В эксперименте кровь человека инкубировали с коллоидным раствором серебра (100 мг/мл) в течение 60 мин и 180 мин при комнатной температуре. Применяемое нами коллоидное серебро содержит частицы с радиусом 205 pm и концентрацией 0,9·10-5 М. Размеры частиц серебра были определены с помощью спектрометра динамического рассеяния света Photocor Complex и составляют 40 нм. Контроль за состоянием морфологии эритроцитов производили при помощи лазерной интерференционной микроскопии (ЛИМ). Изменение конформации гемопорфирина гемоглобина исследовали на рамановском спектрометре in via Basis фирмы Renishaw с короткофокусным высокосветосильным монохроматором (фокусное расстояние не более 250 мм). Для возбуждения рамановских спектров использовался лазер (длина волны излучения 532 нм, мощность излучения 100 мВт, объектив 100х). Регистратор данных – CCD детектор (1024х256 пикселей с пельтье–охлаждением до – 70 ºС) с решеткой 1800 штр/мм. Оцифрованные спектры обработаны в программе WIRE 3.3. Произведена коррекция базовой линии, сглаживание спектров.
Как показали наши исследования при инкубации крови с наночастицами серебра (НЧС) в течение 60 мин содержание гемоглобина в эритроцитах в пределах нормы, и составляет 0,1401 мкг, при этом площадь клетки увеличивается на 6,7 % по отношению к контролю. Отмечается сильная прямая корреляционная связь между объемом эритроцитов и содержанием в них гемоглобина (r = 0,71; р < 0,05). Наблюдаются изменения интенсивности пиков полос спектра КР гемопорфирина гемоглобина эритроцитов по отношению к контролю. Так, соотношение интенсивностей I1375/(I1355+I1375), характеризующее относительное количество оксигемоглобина в суспензии эритроцитов, увеличивается на 9,4 %. Наблюдается сильная отрицательная корреляционная связь между относительным количеством оксигемоглобина и способностью гемоглобина связывать лиганды (в т. ч. кислород) (r = -0,94; р < 0,05) и сродством гемоглобина к лигандам, в первую очередь к кислороду (r = -0,81; р < 0,05). Соотношение интенсивностей I1355/I1550, отражающее относительную способность всего гемоглобина в пробе связывать лиганды (в т. ч. кислород), и соотношение I1375/I1580, характеризующее относительную способность гемоглобина выделять лиганды, уменьшаются на 29,5 % и 7,5 % соответственно. Имеется сильная прямая корреляционная связь между способностью гемоглобина связывать лиганды (в т. ч. кислород) и сродством гемоглобина к лигандам, в первую очередь к кислороду (r = 0,83; р < 0,05). Отношение интенсивностей (I1355/I1550)/(I1375/I1580), отражающее сродство гемоглобина к лигандам, в первую очередь к кислороду, снижается на 25 %.
При инкубации крови с НЧС в течение трех часов наблюдаются увеличение содержания гемоглобина в эритроцитах и площади клеток на 7,9 % и 10,4 % соответственно по отношению к контролю. Отмечается сильная прямая корреляционная связь между площадью эритроцитов и содержанием в них гемоглобина (r = 0,86; р <0,05). Соотношение интенсивностей I1355/I1550, отражающее относительную способность всего гемоглобина в пробе связывать лиганды (в т. ч. кислород), и соотношение I1375/I1580, отражающее относительную способность Гб выделять лиганды, увеличиваются на 9,0 % и в 1,95 раза соответственно. Наблюдается сильная отрицательная корреляционная связь между способностью гемоглобина выделять лиганды и сродством гемоглобина к лигандам, в первую очередь к кислороду (r = -0,9; р < 0,05). Имеется сильная отрицательная корреляционная связь способности гемоглобина связывать лиганды (в т.ч. кислород) с содержанием гемоглобина в эритроцитах (r = -0,74; р< 0,05) и с площадью клеток (r = -0,86; р < 0,05). Отношение интенсивностей (I1355/I1550)/(I1375/I1580), отражающее сродство гемоглобина к лигандам, в первую очередь к кислороду, снижается на 44,7 %. Имеется сильная обратная корреляционная связь между относительным количеством оксигемоглобина и сродством гемоглобина к лигандам, в первую очередь к кислороду (r = -0,64; р < 0,05).
Таким образом, при инкубации крови с коллоидным раствором наносеребра в течение 60 мин наблюдаются изменения в конформации гемопорфирина гемоглобина эритроцитов, которые проявляются в снижении способности связывать лиганды и сродстве гемоглобина к кислороду. При инкубации крови с НЧС в течение трех часов наблюдается сильное повышение способности гемопорфирина гемоглобина выделять лиганды на фоне снижения сродства гемоглобина к лигандам, в том числе к кислороду.
Библиографическая ссылка
Кузьмичева Л.В., Алесова Н.М. ИЗМЕНЕНИЕ СТРУКТУРЫ И ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ИНКУБАЦИИ С КОЛЛОИДНЫМ РАСТВОРОМ СЕРЕБРА // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2013. – № 10-2. – С. 275-276;URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=4175 (дата обращения: 19.04.2024).