. Липопротеины высокой плотности (ЛПВП) участвуют в транспорте биологически активных соединений, регулируют многие метаболические процессы, в том числе углеводный обмен.
Цель исследования
В работе изучено влияние ЛПВП и их основного белкового компонента - апопротеина А-I на продукцию инсулина и активность матриксных металлопротеаз (ММП) 2,7 Р-клетками островков Лангерганса поджелудочной железы крыс Wistar.
Материалы и методы
Островки выделяли седиментационным методом согласно Lacy P. et al. (1967 г.) Липопротеины высокой плотности получали методом препаративного ультрацентрифугирования в растворах KBr на центрифуге «Optima L-90K, Beckman-Coulter» (Австрия). Содержание инсулина измеряли радиоиммунным методом (DSL-1600, Франция). Концентрацию инсулина выражали в мкМЕ/мл. Активность ММП-2,7 в образцах определяли с использованием флуоресцентного субстрата (ICN, США) по методу Nagase et al. (1998 г.) Измерение проводилось на спектрофлуориметре (Shimadzu RF-5301 PC, Япония). Активность ММП измеряли в мкмоль МСА/л/час.
Результаты
Показано, что островки Лангерганса при добавлении к ним 20 мМ глюкозы секретируют в среду (раствор Кребс-Рингера) 7,6 ± 0,53 мкМЕ/ мл инсулина в течение часа инкубации. При этом нами впервые была обнаружена активность ММП в островках Лангерганса, она составляла 5,2 ± 0,56 мкмоль МСА/л/ час. При добавлении глюкозы и ЛПВП концентрация инсулина в среде увеличивалась в 3,4 раза и составила 26,0 ± 1,61 мкМЕ/мл (Р < 0,001), а активность фермента выросла в четыре раза и составила 20,0 ± 0,99 мкмоль МСА/л/час (Р < 0,001). Секреция инсулина повышалась почти в два раза при добавлении глюкозы и апоА-I (15,3 ± 1,21 мкМЕ/мл, Р < 0,002), а активность ММП возрастала до 54,8 ± 5,1 мкмоль МСА/л/ час (Р < 0,001), что превышает базальный уровень более чем в 10 раз.
Выводы. Предполагают, что ММП участвуют в деградации препрогормона (м.м. = 12 kDa) и отщеплении С-пептида от прогормона (м.м. = 9 kDa) с образованием молекулы инсулина (м.м. = 6 kDa). Механизм влияния ЛПВП и апо А-I на продукцию инсулина и активность ММП обсуждается.