В патофизиологии сердечно-сосудистых заболеваний одно из ключевых мест занимает гипоксия, так как при этом происходит нарушение газотранспортной функции крови и, во многих случаях, снижение эффективности переноса кислорода эритроцитами. Одной из важных причин нарушения кислородтранспортной системы может быть изменение конформации гемопорфирина гемоглобина (Hb) и его сродства к кислороду (О2). Изменение конформации гемопорфирина и О2-связывающих свойств гемоглобина исследовали методом спектроскопии комбинационного рассеяния. Исследование выполнено на рамановском спектрометре in via Basis фирмы Renishaw с короткофокусным высокосветосильным монохроматором (фокусное расстояние не более 250 мм). Для возбуждения рамановских спектров использовался лазер (длина волны излучения 532 нм, мощность излучения 100 мВт, объектив 100х). Регистратор данных – CCD детектор (1024×256 пикселей с пельтье–охлаждением до – 70 °С) с решеткой 1800 штр/мм. Оцифрованные спектры обработаны в программе WIRE 3.3. Произведена коррекция базовой линии, сглаживание спектров. В данной работе для анализа конформации гемопорфирина гемоглобина (Hb) использовали характерные полосы спектра КР (указаны положения максимумов): 1172, 1355, 1375, 1548–1552, 1580–1588, 1618, 1668 см–1. Функциональную активность красных кровяных клеток определяли по содержанию эритроцитов, среднему объему эритроцита (MCV) и средней концентрации гемоглобина (MCHC) в клетках. Как показали наши исследования в крови практически здоровых людей (n = 9) содержание эритроцитов в пределах 4,57 ± 0,09·1012, средний объем эритроцита, и средняя концентрация гемоглобина в клетках составляет соответственно 94,3 ± 2,24 fl и 316,2 ± 2,04 г/л. У больных инфарктом миокарда (n = 10) в эритроцитах средняя концентрация гемоглобина в клетках в пределах нормы и составляет 312 ± 1,6 г/л. У всех обследованных наблюдается разный объем клеток: у 67 % показатель MCV в пределах 80–100 fl, эритроциты характеризуются как нормоциты, 33 % – объем эритроцитов больше 100 fl (макроциты). В эритроцитах наблюдаются изменения в соотношении интенсивности полос КР спектров. Так, отношение интенсивностей I1355/I1550, отражающее относительную способность всего гемоглобина в пробе связывать лиганды (в т.ч. кислород), увеличивается на 13,0 %. Интенсивность соотношения полос спектров (I1355/I1550)/(I1375/I1580), отражающее сродство гемоглобина к лигандам, в первую очередь, кислороду увеличивается на 22,0 %. Отношение интенсивностей I1618/I1580, характеризующееся содержанием комплексов Hb с NO, при наличие связи между атомом Fe2+ и глобином, составляет 0,36±0,06 отн. ед., что выше контрольных значений на 53 %. Сравнительная статистическая оценка функциональной активности эритроцитов крови позволила установить тесную корреляционную связь между объемом эритроцитов и сродством гемоглобина к лигандам (r = 0,67; р < 0,05) и с содержанием комплексов Нb с NO при наличие связи между атомом Fe2+ и глобином (r = 0,50; р < 0,05). Имеется сильная корреляционная связь между содержанием гемоглобина в эритроците и относительным количеством оксигемоглобина (r = 0,63; р < 0,05). Обнаружили, что содержание комплексов Hb с оксидом азота, при наличии связи между атомом Fe2+ и глобином, сильно отрицательно коррелирует со сродством гемоглобина к кислороду (r = –0,66; р < 0,05). Наблюдается сильная положительная корреляционная зависимость относительной способности Hb выделять лиганды с содержание комплексов Hb с оксидом азота при наличии связи между атомом Fe2+ и глобином (r = 0,77; р < 0,05) и отрицательная корреляционная зависимость со сродством Hb к кислороду (r = –0,77; р < 0,05).
Таким образом, при инфаркте миокарда наблюдаются морфофункциональные изменения эритроцитов, которые проявляются в снижении объема клеток, при этом на фоне повышения способности всего гемоглобина в пробе связывать лиганды и сродства гемоглобина к лигандам, увеличивается содержание комплексов гемоглобина с оксидом азота, при наличие связи между атомом Fe2+ и глобином.
Библиографическая ссылка
Кузьмичева Л.В., Акимова Е.А. ИССЛЕДОВАНИЕ О2-СВЯЗЫВАЮЩИХ СВОЙСТВ ГЕМОГЛОБИНА В ЭРИТРОЦИТАХ ПРИ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2014. – № 3-2. – С. 109-110;URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=4863 (дата обращения: 23.11.2024).