Какие средства предупреждения непланируемой беременности наиболее распространены в нашей стране? Это, конечно же, гормональная контрацепция и внутриматочные противозачаточные средства [6, 19]. Многие вопросы внутриматочной контрацепции освещены в литературе, но онкологические ее аспекты [12], окончательно не изучены. При применении внутриматочных противозачаточных средств (ВМС) многие исследователи не обнаружили злокачественного роста [10, 14, 16], но выявили у части женщин различные изменения в эндометрии [13, 18], в том числе хронический неспецифический эндометрит [7, 8, 11], асинхронизм структурных преобразований эндометрия, очаговую и железистую гиперплазию [9, 15] аденоакантоз, полипоз и т.п.[4]. По мнению К.П. Ганиной [3], длительно существующий воспалительный процесс, нарушающий трофику тканей, неравномерно выраженные очаги пролиферации без тенденции к созреванию, очаги и поля метаплазии, возникшие на фоне хронического воспалительного процесса или гормонального дисбаланса, могут быть основой для развития злокачественных опухолей.
В настоящее время установлено, что клетки злокачественных новообразований характеризуются большим содержанием ДНК в ядрах, чем клетки нормальных тканей. В процессе канцерогенеза наряду с кратным увеличением содержания ДНК в ядрах клеток (плоидия) происходит увеличение их гетерогенности по содержанию ДНК [1, 3, 5, 17].
С целью выявления пролиферативных свойств эндометрия, а следовательно, для оценки степени риска в отношении возможной малигнизации при применении негормональных ВМС мы исследовали содержание ДНК в клетках эпителия желез слизистой оболочки матки у 67 женщин детородного возраста с нормальным менструальным циклом , имеющих в анамнезе одну или несколько беременностей и использовавших ВМС от 6 мес. до 12 лет. Средний возраст пациенток составил 28,5+/-1,4 года.
Цуги или соскобы эндометрия получали на 8-10-й или на 19-23-й день менструального цикла при использовании ВМС или сразу после их удаления. Для исследования были отобраны препараты, в которых эндометрий на фоне применения ВМС не имел патологических изменений и соответствовал дню менструального цикла. Контрольную группу составило 12 женщин, у которых цуг эндометрия брали перед введением ВМС. ДНК в срезах толщиной 6-7 мкм выявили по Фейльгену. Условия окраски всех срезов были одинаковыми. Для количественного определения ДНК пользовались методом адсорбционной цитофотометрии на интегрирующем скеннирующем микроспектрофотометре. В каждом препарате исследовали количество ДНК в 25-50 ядрах эпителиальных клеток и 25 ядрах лимфоцитов (количество исследуемых ядер определялось разбросом их по содержанию ДНК). За количество ДНК, соответствующее диплоидному набору хромосом (2n), принимали среднее содержание ДНК в ядре лимфоцита того же среза. Вычисляли обобщенный показатель кинетики изменений количества ДНК в железистом эпителии эндометрия – индекс накопления ДНК (ИН ДНК), представляющий собой среднюю величину от суммы произведений количества клеток на соответствующие им единицы плоидности ядер [2]. Полученные результаты сравнивали с контролем, обрабатывали статистически с использованием критерия Стъюдента.
В контрольной группе на 8-10-й день менструального цикла ИН ДНК в ядрах клеток железистого эпителия эндометрия составлял 2,72+/-0,03, модальным классом являлись клетками с диплоидным набором ДНК, количество которых составляло 58,2 %. Полиплоидия клеток эпителия была невелика: клетки с гипертетраплоидным содержанием ДНК составляли 3,5 %, тетраплоидных ядер насчитывалось 13,1 %. Довольно высоко в пролиферирующем эндометрии количество клеток с промежуточным (3n) содержанием ДНК (25,2 %).
В средней стадии секреции контрольных циклов ИН ДНК в ядрах железистых клеток эндометрия равнялся 2,60+/-0,02, преобладали клетки с диплоидными ядрами (48,1 %), увеличивалось количество клеток с промежуточным набором ДНК (32,8 %). По сравнению со стадией пролиферации в слизистой оболочке матки также появлялись клетки с гиподиплоидным содержанием ДНК (4,2 %), клетки с тетраплоидными ядрами обнаруживались чаще (14,9 %, Р > 0,05), клетки гипертетраплоидной области не встречались.
Таким образом, проведенное исследование показало, что ИН ДНК в клетках желез эндометрия в течение контрольного менструального цикла изменялся незначительно. Данные о распределении клеток по плоидности в различные фазы контрольного менструального цикла указывают на преобладание клеток с диплоидным набором ДНК. Отмечено также наличие гипертетраплоидных клеток в пролиферативной фазе и появление клеток с гипоплоидным содержанием ДНК в секреторной фазе цикла.
В группе женщин, применявших ВМС до 1 года, отмечено статистически недостоверное снижение ИН ДНК : в фазу пролиферации до 2,61+/-0,012, в фазу секреции до 2,53+/-0,051. На 8-10-й день менструального цикла в популяции преобладали клетки с диплоидным содержанием ДНК (61,2 %), число клеток с промежуточным набором ДНК составляло 22,3 %, с тетраплоидным -12,1 %. Появились клетки с гиподиплоидным содержанием ДНК (1,8 %). На 19-23-й день цикла в эпителии желез эндометрия модальным классом являлись клетки в G1-периоде (49,2 %). Количество клеток в S-периоде не изменялось по сравнению с контрольными циклами и составило32,9 %, клетки в G2 периоде были обнаружены лишь в 11.8 %.
В группе женщин, пользовавшихся ВМС в течение 1-3 лет, ИН ДНК в ядрах железистых клеток несколько превышал данные контрольной группы и был равен 2,74+/-0,06 (Р > 0,05) в среднюю фазу пролиферации в 2,64+/-0,03 (Р > 0,05) в среднюю фазу секреции. Распределение клеток по содержанию ДНК было подобно таковому в контрольной группе. В фазу пролиферации клетки клетки с диплоидным набором ДНК составляли 59 %, из них гиподиплоидных было 1,5 %, количество клеток с промежуточным содержанием ДНК равнялось 24,6 %, с тетраплоидным – 12,2 %, гипертетраплоидный состав состав ДНК имели 4,2 % клеток. В фазу секреции превалировали клетки в диплоидной моде (47 %), промежуточный состав ДНК отмечен в 34,2 % ядер. Количество тетраплоидных ядер несколько возросло (15,7 %, Р > 0,05), гиподиплоидных – уменьшилось (3,1 %) по сравнению с контролем.
В группе пациенток, пользовавшихся ВМС в течение 3-5 лет, ИН ДНК в железистом эпителии составлял 2,69+/-0,04, в пролиферативную стадию он был несколько выше, чем в секреторную (2,6+/-0,01). В обе фазы цикла в эпителии желез эндометрия модальным классом являлись клетки с диплоидным содержанием ДНК, количество которых на 8-10-й день цикла составляло 56,1 %, на 19-23-й день – 51 %. Наряду с этим в железах обнаруживались клетки с тетраплоидным содержанием ДНК (14,3 % в среднюю пролиферативную фазу и 14 % в среднюю секреторную фазу), клетки с промежуточным набором ДНК составляли соответственно 23,1 и 32 %. Гиподиплоидные ядра определялись в 1,8 % в секреторной и в 2,8 % – в пролиферативной стадии менструального цикла.
При применении ВМС в течение 5-7 лет ИН ДНК оставался на уровне контрольной группы и составлял в среднюю стадию пролиферации 2,73+/-0,061, в среднюю стадию секреции 2,61+/-0,042. В распределении ядер по количеству ДНК в пролиферативную фазу по-прежнему доминировали клетки диплоидной области (55,2 %). Наряду с этим в железах увеличивался процент клеток с тетраплоидным содержанием ДНК (21 %), однако это увеличение не было статистически значимым (Р > 0,05). Промежуточный состав ДНК обнаруживался в 17,2 % клеток, гиподиплоидный – в 3,6 %. На 19-23-й день цикла большинство клеток аккумулировалось в области диплоидной моды, их в популяции насчитывалось 49,1 %. Клетки с тетраплоидным содержанием ДНК составляли 16,5 %, с промежуточным – 30,2 %, с гиподиплоидным – 4,2 %.
У пациенток, использовавших ВМС более 7 лет, на 8-10-й день менструального цикла в ядрах железистых клеток эндометрия ИН ДНК был равен 2,74+/-0,028, определялось несколько большее количество тетраплоидных (19,9 %, Р > 0,05) клеток по сравнению с контролем. В то же время уменьшалось число клеток с промежуточным набором ДНК (18,3 %, Р > 0,05) и встречались клетки с гиподиплоидным содержанием ДНК (2,4 %). Количество диплоидных клеток не изменялось относительно контрольных циклов (56,3 %). В фазу секреции ИН ДНК равнялся 2,58+/-0,01, количество клеток в G1-периоде составило 54,3 % (из них диплоидных 51,1 %, гиподиплоидных 3,2 %), в S-периоде –31,3 %, в G2-периоде – 14,4 %.
Таким образом, на фоне применения ВМС ИН ДНК в железистом эпителии эндометрия изменялся незначительно. Лишь в группе женщин, пользовавшихся ВМС сроком до 1 года, была отмечена тенденция к снижению содержания ДНК, что, возможно, является проявлением адаптации организма к внутриматочному контрацептиву и обусловлено нарушением утилизации стероидных гормонов в клеточных элементах органов-мишеней [5]. Однако снижение пролиферативной активности эндометрия было транзиторным, и при более длительном применении ВМС определялось нормальное содержание ДНК.
Некоторые изменения были обнаружены в распределении ядер железистых клеток эндометрия по плоидности на фоне применения ВМС. Так, в группах женщин, использующих длительное время (более 5–7 лет) ВМС, отмечена тенденция к уменьшению количества клеток с промежуточным содержанием ДНК и увеличению – с тетраплоидным набором ДНК в пролиферативную стадию цикла (Р > 0,05). Независимо от длительности использования ВМС в среднюю стадию пролиферации определялось незначительное число клеток с гиподиплоидным содержанием ДНК, что, по-видимому, обусловлено деструкцией части клеток эндометрия под воздействием инородного тела (внутриматочного контрацептива). Следовательно, при применении ВМС в железистом эпителии слизистой оболочки матки патологической пролиферации эндометрия не наблюдается.