Насекомые, наиболее многочисленные в природе, относятся к двукрылым (их описывается более 160 тысяч видов). Они распространены повсеместно, включая Антарктиду. Многие кровососущие двукрылые являются переносчиками инфекционных заболеваний, паразитами на личиночной стадии и др. Наиболее характерные представители двукрылых в Европе – слепни, оводы и мухи. Широко распространены на территории РФ, причем, в разных климатических зонах встречается более 80 видов мух, многие из которых являются переносчиками инфекционных заболеваний, как специфическими, так и механическими. Из оводов, паразитирующих у диких животных, заслуживают внимания виды Cephenomyia Kaplanovi sp. nova, С. Ulrichii, Hypoderma sp., Pharingomyia picta, носоглоточные и подкожные оводы копытных, оводы американского рода Cuterebra, живущие под кожей грызунов и др. Оводы паразитирует на различных носителях. Носоглоточные оводы живородящи, самка на лету вбрызгивает личинок в ноздри овец, коз, лошадей, верблюдов, оленей, антилоп. На человека нападают большей частью как случайные паразиты, в тропической Америке – Ver macaque и moyocui. Наиболее часто у человека встречаются миазы глаз (офтальмомиаз) и носа, реже – оральный миаз (главным образом, при алкоголизме, наркомании и иммунодефицитах). Помимо вышеуказанной локализации, личинки иногда поражают глотку, гортань, носовую полость, и редко, ухо. Главный симптом – боль, иногда сопровождающаяся лихорадкой и недомоганием. При этом наблюдается кашель, чиханье, жжение и зуд в местах поражения, эозинофилия. Зондирование выявляет наличие инородных тел. Описаны случаи желудочно-кишечной локализации личинок оводов рода Oestrus, весьма близкого к Cephenomyia, при этом наблюдалось нарушение перистальтики, рвота. Ветеринарная служба в РФ осуществляет ряд мероприятий по борьбе с эстрозами среди сельскохозяйственных животных, вопросы же их профилактики среди диких животных остаются открытыми. Поэтому на основе комплексного изучения биологических, экологических и эпизоотологических особенностей предпринята попытка оптимизировать систему профилактических мероприятий, обеспечивающих защиту животных и человека. Для достижения данной цели были определены следующие задачи: установить особенности экологии личинок и имаго оводов, паразитирующих у лосей в Кировской области, патанатомические особенности цефеномийоза и провести сравнительную оценку эффективности современных препаратов для борьбы с личинками овода.
Материалы и методы исследования
Изучены некоторые вопросы фенологии и экологии носоглоточного овода в Кировской области. Степень инвазированности личинками рассчитывали по результатам патологоанатомического исследования, отделов носоглотки и синусов. Для гистологических исследований фиксацию головного мозга проводили в течение 14 суток со сменой фиксатора через неделю, вырезали поперечные кусочки толщиной 0,3–0,5 см из головного мозга, которые дополнительно фиксировали в течение суток в аналогичном солевом растворе формалина, уплотняли в парафине, после чего готовили гистологические срезы, которые окрашивали гематоксилин-эозином. Изготовление парафиновых гистологических срезов толщиной 5–7 мкм проводили по общепринятым стандартным методикам (на санном микротоме МС-2). Фотографии сделаны с использованием системы Vision Bio (Epi 2014г.) при увеличении Х 75, с автоматической обработкой сигнала и выведением на дисплей. Обработку личинок проводили препаратами широкого спектра действия: аверсект-2, азида натрия (0,1 %), хлорофоса (0,1 %) и формалина (1 %). Подготовительные работы по деларвации проводили согласно требованиям технологии по первичной обработке продуктов убоя, производили зачистку носоглотки и пазух от личинок, которых помещали в растворы дезинфектантов, фрагменты синусов, которые невозможно освободить от личинок помещались в раствор целиком.
Результаты исследования и их обсуждение
В списке эндопаразитов на первом месте по биологическому значению для копытных и для лося, в частности, стоят представители семейства Oesteridae, в меньшей степени гельминты (кишечные и диктиокаулез) [12]. По сравнению с другими паразитирующими на диких копытных, особенно оленях, высшими беспозвоночными, по массовости и распространенности оводы играют главенствующую роль. В этом отношении копытные млекопитающие отличаются от хищников, у которых главными паразитами, сильно влияющими на численность, являются различные гельминты. Личинки носоглоточного овода встречаются до 8-10 июля включительно, а лоси, убитые весной, поражены ими, как правило, все. Лет взрослой формы отмечается с 20 июля по 3 сентября. Самки овода вбрызгивают своих живых личинок налету, приближаясь к голове и ноздрям животного [8-10, 14]. Однако зарегистрированы случаи попадания личинок в нос и глаза человека, с развитием назального или глазного миаза. Болеют пастухи и фермеры, реже охотники. Эстрозы встречается в Афганистане, Индии, Ираке, Иране, Италии, Канарских островах, Карибском регионе, Кувейте, Ливии, Омане, Пакистане, Тунисе, Франции, Средней Азии, России. Мельчайшие, очень подвижные личинки, попав в жидкий субстрат назального секрета, быстро продвигаются в носовую и глоточную полости, где, видимо, и зимуют, задерживаясь в развитии до весенних месяцев, апреля-мая [1, 8]. Выпадение взрослых личинок у животных происходит в июне и июле. Состояние куколки (pupa) длится около месяца. У одного зверя часто встречаются личинки на разных стадиях развития, что можно объяснить неоднократными откладываниями оводом живых личинок. Локализуются личинки в глоточных пазухах, плотно присосавшись к ткани и выставив хвостовую часть с парой отверстий для дыхания. Отсюда они часто проникают в заднюю часть носовой полости, синусы и в евстахиевы трубы. Личинки обладают чрезвычайно плотными наружными покровами, не поддающимися воздействию даже сильнодействующих веществ.
Носоглоточный овод из рода Cephenomyia паразитирует на всем пространстве ареала лося в Евразии; он известен в Германии и Прибалтике, на европейской части РФ, Сибири и в Забайкалье, в северо-западной Маньчжурии и Сихотэ-Алине. Как правило, в сроки, когда можно встретить личинок, обнаружена поголовная зараженность всех добытых зверей. Установлено по данным отечественных исследователей широкое распространение носоглоточного овода в лесных зонах РФ, на фоне снижения популяции насекомых в Московской области. Периодическое изменение зараженности личинками популяций копытных может зависеть от метеорологических условий времени выпадения личинок и лета взрослой формы и местопребывания животного в эти моменты жизни оводов. Но в большей степени на развитие овода влияют не климатические или физико-географические условия, а состояние систем гомеостаза лося в критический период выпадения личинок. До недавнего времени в Кировской области отмечалось незначительное распространение этого заболевания на фоне низкой интенсивности инвазии, однако, в последнее время зарегистрированы случаи множественного паразитирования личинок у диких животных. Так, например, наблюдали случай паразитирования более 300 личинок овода у лося, зашедшего на территорию г. Кирова, животное было истощено, реакция на раздражители снижена, наблюдалась статическая и динамическая атаксия.
Рис. 1. Личинки Cephenomyia Ulrichii в носоглотке лося
При вскрытии выявлены скопления личинок в носоглотке и пазухах (рис. 1), выраженный отек мозговых оболочек. При микроскопии обнаружены выраженные воспалительные изменения цитоархитектоники головного мозга: периваскулярная инфильтрация мононуклеарами и плазматическими клетками, значительная пролиферация микроглии, дистрофические изменения ганглиозных клеток, произошедшие в результате воздействия продуктов жизнедеятельности личинок (рис. 2). Слизистая оболочка носоглотки, синусов и глоточные миндалины гиперемированы (рис. 1), имеются обширные зоны поражения тканей, множество разрушенных клеток, десквамация эпителия, базальные слои, прилегающие к месту внедрения, отечны и инфильтрированы.
Рис. 2. Кора больших полушарий, перинуклеарный отек, увеличение: 100х75 (гематоксилин-эозин)
Личинки на данной стадии развития не опасны для человека, однако, необходимо предотвращать их окукливание и сжигать или уничтожать с помощью химических веществ. В связи с тем, что летом запрещено разжигать костры в лесу из-за опасности пожара, мы предприняли попытку изучения действия различных дезинфектантов на личинок данного овода. При проведении сравнительных исследований при уничтожении личинок оводов и мух раствора азида натрия (0,1 %), хлорофоса (0,1 %) и формалина (1 %), установлено что в 1 % растворе формалина личинки оставались живыми в течение 3–4 дней, хотя по данным Капланова Л.Г., помещенные личинки, выделенные от лося в Сибири, в 4-процентный раствор формалина, жили там, в течение 3 суток [10]. В растворе аверсекта-2 оставались живыми в течение 2 суток. Наиболее эффективными оказались растворы азида натрия и хлорофоса, в 0,1 % растворе азида натрия и хлорофоса личинке погибали в течение нескольких часов. Однако, в отличие от формалина и хлорофоса азид натрия не вызывает гибели аборигенной микрофлоры почвы, и даже обладает стимуляцией размножения азотфиксирующих форм [1-7]. Для радикального уничтожения насекомых необходимо, вместе с обработкой контактными инсектицидами больных животных, выявить и обработать места скопления куколок, причем приоритетным в выборе на наш взгляд является 0,1 % раствор азида натрия [2, 6, 11, 13].