Проблема регулирования рождаемости – одна из самых актуальных проблем современного общества [7, 16, 20, 23]. Нередко обстоятельства складываются так, что женщина временно не может иметь детей по состоянию здоровья или вследствие каких-то иных причин [17, 21]. Кроме того, опыт ВОЗ показывает, что обеспечение интервалов между родами не менее, чем 2-2,5 года, позволяет снизить детскую смертность в родах в 4, а материнскую – в 2 раза [18]. Одним из самых распространенных методов контрацепции в нашей стране считаются внутриматочные контрацептивные средства (ВМК). Интерес авторов вызывают различные аспекты использования ВМС [11, 13, 14, 15].
При применении ВМК исследователи обнаруживали в эндометрии различные патологические процессы [6, 8, 10, 12, 19]. Клетки эпителия желез эндометрия человека обладают способностью секретировать гликоген. Изучение содержания гликогена в эндометрии позволяет судить о функциональной активности последнего и о гормональных влияниях на него [9].
Содержание гликогена в эндометрии в различные фазы менструального цикла изучали ряд авторов [1–4, 22, 26, 27], однако результаты этих исследований разноречивы.
Целью настоящей работы явилось гистохимическое исследование содержания гликогена в эндометрии женщин, применяющих инертные внутриматочные контрацептивы – ВМК в течение 6 мес – 12 лет.
Материалы и методы исследования
Слизистая оболочка матки исследована у 78 здоровых женщин в возрасте 23–42 лет в различные фазы менструального цикла. До 1 года пользовались ВМК 8 женщин, до 3 лет – 15, до 5 лет – 21, до 7 лет – 18, до 10 лет – 9, более 10 лет – 7 женщин. Контрольную группу составили 20 здоровых женщин в возрасте от 21 года до 38 лет, во время обследования не применявших ВМК, но в дальнейшем использовавших этот вид контрацепции.
Биопсию эндометрия проводили в различные фазы менструального цикла. В основной группе цуг или соскоб эндометрия получали при наличии ВМК или сразу после его удаления. Эндометрий фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина и после соответствующей гистологической обработки готовили парафиновые срезы толщиной б—9 мкм.
Гликоген выявляли методом Шабадаша с контрольной обработкой срезов амилазой слюны в течение 5 мин. Параллельно с гистохимическим проводилось гистологическое исследование эндометрия (окраска гематоксилином и эозином).
Количественную оценку гистохимических реакций на гликоген проводили по методу Astaldi в модификации А.Б. Павловой и соавт. Интенсивность окраски гликогена, выявляемого гистохимическим методом, оценивали в 100 клетках: интенсивное (+ + +), умеренное (+ +), слабое (+) окрашивание, 0 – отсутствие окраски. Средний гистохимический цветовой показатель (СГЦП) определяли как частное от деления на 100 суммы произведений количества клеток на соответствующее им количество плюсов интенсивности окрашивания. Полученные данные обрабатывали статистически с использованием критерия достоверности Стьюдента.
Результаты исследования и их обсуждение
В контрольной группе женщин фаза пролиферации характеризовалась низким уровнем гликогена как в клетках эпителия желез (СГЦП = 1,03 ± 0,01), так и в клетках стромы (СГЦП = 0,52 ± 0,01) эндометрия. С 5-го по 10-й день менструального цикла в клетках эпителия желез гликогена содержалось мало. В стадии поздней пролиферации (11 – 14-й день) в базальных отделах эпителиальных клеток большинства желез гликоген появлялся в виде мелких гранул. В строме гликоген определялся в незначительном количестве в цитоплазме клеток, расположенных вблизи желез. С 16–17-го по 23–24-й день менструального цикла обнаруживались крупные гранулы гликогена, преимущественно в апикальных частях клеток желез эндометрия, хорошо прослеживался апокриновый характер секреции (СГЦП = 2,59 ± 0,03). Из-за обилия гликогена во многих клетках ядра располагались у базальной мембраны. К концу секреторной фазы цикла гликоген определялся преимущественно внеклеточно, в эпителии большинства желез гликоген отсутствовал (СГЦП = 0,09 ± 0,01). В фазу секреции гликоген выявлялся постоянно в клетках стромы, при этом интенсивность накопления его была меньше, чем в эпителиальных клетках (СГЦП = 1,83 ± 0,02).
Таким образом, определение содержания гликогена в эндометрии здоровых женщин детородного возраста показало, что интенсивность его накопления на протяжении менструального цикла постоянно меняется и определяется воздействием половых гормонов.
У женщин, применявших ВМК, на 8–10-й день менструального цикла гликоген в железистом эпителии эндометрия обнаруживался в виде небольших гранул, преимущественно в апикальной части клеток (СГЦП = 1,24 ± 0,01; р > 0,05).
В клетках стромы встречались единичные гранулы гликогена (СГЦП = 0,49 ± 0,01; р > 0,05), т.е. в железистом эпителии эндометрия в пролиферативную фазу менструального цикла на фоне применения ВМК отмечалась тенденция к накоплению гликогена.
В секреторную фазу менструального цикла содержание гликогена в железах было примерно таким же, как в контроле (СГЦП = 2,32 ± 0,02; р > 0,05). Распределялся он преимущественно в апикал ьной части клеток железистого эпителия эндометрия. В клетках стромы гликоген выявлялся в меньшем количестве по сравнению с контрольной группой (СГЦП = 1,34 ± 0,01; р > 0,05).
Анализ данных гистохимического исследования в зависимости от срока применения ВМК показал, что подобное распределение гликогена в эндометрии происходит в течение 1-го года после введения контрацептива и в дальнейшем (при более длительном его использовании) не претерпевает значительных изменений.
Результаты наших исследований, как и данные Б.И. Железнова и соавт. [3], В.И. Грищенко и соавт. [2], Rosado и соавт. [27], показывают, что при применении ВМК в секреторной фазе менструального цикла накопление гликогена в строме эндометрия уменьшается. Это может свидетельствовать о повышенном расходовании гликогена вследствие усиления обменных процессов в эндометрии при наличии в полости матки контрацептива. Известно, что увеличение содержания гликогена в секреторную фазу цикла в эндометрии способствует нидации оплодотворенной яйцеклетки [24].
По данным Л.А. Мозжухиной [5], уменьшение содержания гликогена в эндометрии может быть причиной бесплодия и привычных выкидышей. Можно предположить, что выявленное нами уменьшение содержания гликогена в строме слизистой оболочки матки в секреторную фазу цикла является одним из механизмов контрацептивного действия ВМК. Однако следует учитывать и данные Huges и Csermely [25], показавших, что одинаковое содержание гликогена в пролиферативную и секреторную фазы может свидетельствовать об усиленной пролиферации клеток эндометрия.
При гистохимическом исследовании цугов эндометрия у 18 женщин через 6 мес после удаления ВМК У 15 из низ выявлено нормальное содержание гликогена в слизистен оболочке матки. СГЦП составил в железистом эпителии 1,5 ± 0,01 в фазу пролиферации и 2,63 ± 0,03 в фазу секреции, в клетках стромы – соответственно 0,54 ± 0,0 и 1,79 ± 0,02 (при сравнении с контролем р > 0,05).
Выводы
Таким образом, выявленное уменьшение количества гликогена в строме эндометрия секреторной фазы и тенденцию к накоплению его в эндометрии пролиферативной фазы цикла при применении ВМК можно рассматривать как изменение функционального состояния слизистой под действием ВМК. Эти данные подтверждают значение эндометриального фактора в достижении контрацептивного эффекта ВМК.