В пищеварительном тракте животных и птиц имеются основные необходимые ферменты, с помощью которых происходит химическое превращение компонентов корма, в результате чего они становятся доступными для всасывания. При нормальной функции пищеварения у животных нет необходимости в добавках пепсина, трипсина и других протеаз, либо других ферментов. Они эффективны только при кормлении молодняка в первые недели жизни, при отъеме от матери, когда действие лактазы уменьшается, а деятельность других еще недостаточна [14], а также у животных с нарушением ферментативных функций желудочно-кишечного тракта, то есть только в качестве заместительной терапии [13] или при избытке в рационе трудногидролизуемых компонентов и ингибиторов ферментов, содержащихся в кормах [8, 9]. Эффективность собственной ферментной системы снижается также при заболеваниях в результате изменения температуры тела и рН среды в отдельных участках желудочно-кишечного тракта. Кроме того, при увеличении в рационе кормов, содержащих большое количество трудногидролизуемых питательных веществ, собственных ферментов организма оказывается недостаточно для их переваривания. Именно поэтому, в этих случаях желательно применять ферменты, полученные биотехнологическим способом [1]. Однако в пищеварительном тракте моногастричных животных нет ферментов, которые бы расщепляли целлюлозу, гемицеллюлозу, лигнин, пектин, соли фитиновой кислоты и многие другие сложные органические соединения. Проблема антипитательных факторов обостряется при повышении уровня ячменя, ржи и других подобных зерновых кормов в рационах животных и птиц до максимума (60–70 %). Таким образом, возникает, весьма, актуальная задача снижения потерь питательных веществ корма путем повышения их переваримости и лучшего использования в организме [6]. Решение данной проблемы, по мнению многих ученых, возможно при использовании в кормлении животных различных ферментных препаратов [2] среди которых широкое применение нашли препараты на основе фитазы.
Цель исследования. Изучение влияния фитазы на убойные качества и содержание химических веществ в тканях тела цыплят-бройлеров при различном уровне общего фосфора в рационе.
Материалы и методы исследования
Экспериментальная часть работы была выполнена в соответствии с протоколами Женевской конвенции и принципами надлежащей лабораторной практики (Национальный стандарт Российской Федерации ГОСТ Р 53434–2009) [3]. Исследование проведено в соответствии со стандартными процедурами эксплуатации биообъектов. Уход за животными осуществлялся согласно правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ 3 51000.4–96) [4]. Эксперименты проводились в соответствии с требованиями гуманного обращения с животными [5].
Характеристика ферментного препарата. В работе использовался ферментный препарат «Ронозим NT (CT)», активное вещество которого представлено фитазой (10000 ед/г), полученной из Peniophora lycii путем глубинной ферментации модифицированных микроорганизмов Aspergillus oryzae. Препарат представляет собой гранулированные частицы бежевого цвета, покрытые оболочкой. Продукт полностью совместим с другими компонентами корма. Гранулированные частицы имеют средний размер 500 мкм; продукт не образует пыли. В системе IUB (Международный Биохимический Союз) «Ронозим NT (CT)» классифицируется как фитаза (№ 3.1.3.26). Учитывая сложившиеся в международной практике нормы (Бюллетень ВАК, 2001, №4), торговое название и фирма-производитель использованного препарата указывается нами только в разделе «методика», в дальнейшем же данные наименования будут заменены на непатентованные названия в соответствии со своим активным началом, так, «Ронозим NT (CT)» будет именоваться как фитаза [10].
Животные и дозировка. Исследования выполнены на модели цыплят-бройлеров кросса «Смена-7» в условиях экспериментально-биологической клиники (вивария) ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный университет». Для проведения исследований были отобраны цыплята в возрасте 7 дней. Помещение для содержания подопытной птицы было оборудовано системой вентиляции. Температурный режим осуществлялся с помощью терморегулятора для внутренних помещений RTR-B для под- держания заданной температуры, с точной регулировкой температуры от +15 до +25 °С (ошибка – не более 1°С). Режим освещения – 12 ч свет/12 ч темнота. Влажность помещения составляла 60 %. Проведена оценка качества воздуха по нескольким компонентам: содержание кислорода – 18 %, углекислота – 0,15 %, аммиак – 7 мг/м3 и сероводород – 2 мг/м3 . Микроклимат в помещении соответствовал требованиям ВНИТИП (2004) [17]. Для проведения исследования были использованы клетки КУН-05 с полезной площадью 4050 см 2 (90 / 45 / 45 см), изготовленные из оцинкованной сварной сетки и оцинкованного железного листа. Клетки оснащены автоматическими 2–хниппельными поилками с полипропиленовым шлангом, кормушкой (длина – 90 см), оцинкованным поддоном. Кормление опытной птицы проводилось 2 раза в сутки. Поение осуществлялось вволю. При составлении рационов с различным уровнем общего фосфора в экспериментах на цыплятах-бройлерах расчеты были произведены с учетом поставленной цели, согласно методическим указаниям по расчету рецептов комбикормовой продукции ВНИТИП (2008). Выбор дозировки ферментного препарата был обусловлен в соответствии с рекомендациями компании производителя [11].
Экспериментальные группы. В общей сложности 180 семидневных цыплят-бройлеров весом 160–180 грамм методом пар-аналогов были распределены на шесть экспериментальных групп (n=30): контрольная и 5 опытных. В первую неделю эксперимента подопытная птица находилась в условиях подготовительного периода.
Птица контрольной группы (К) в основной учетный период получала основной рацион (ОР), сбалансированный по всем питательным веществам, с уровнем общего фосфора – 7 г/кг и доступного – 4 г/кг. I опытная группа получала ОР, с уровнем общего фосфора – 7 г/кг и доступного – 4 г/кг, с включением в комбикорм фитазы «Ронозим NТ (CT)» в дозировке 150 мг/кг. II группа – ОР, с уровнем общего фосфора – 6 г/кг и доступного – 3 г/кг. III группа – ОР, с уровнем общего фосфора – 6 г/кг и доступного – 3 г/кг, с включением в комбикорм фитазы «Ронозим NТ (CT)» в дозировке 150 мг/кг. IV группа – ОР, с уровнем общего фосфора – 5,8 г/кг и доступного – 2,8 г/кг. V группа – ОР, с уровнем общего фосфора – 5,8 г/кг и доступного – 2,8 г/кг, с включением в комбикорм фитазы «Ронозим NТ (CT)» в дозировке 150 мг/кг.
Наблюдение и вскрытие. Цыплят-бройлеров ежедневно наблюдали на протяжении всего периода эксперимента. Контроль над ростом особей осуществлялся ежедневно путем индивидуального взвешивания, утром, до кормления (± 2 г). На основании взвешиваний был рассчитан абсолютный и среднесуточный приросты, изучена динамика роста подопытных животных. В назначенный день терминации (35–е сутки) всю подопытную птицу умерщвляли путем электрического оглушения (напряжение 550 или 950 В, не более 5 с), с последующим обескровливанием. Затем проводили послеубойную анатомическую разделку тушек по методике ВНИТИП (2008) [12], в ходе которой измерялись абсолютные и относительные массы внутренних органов.
Анализ содержания химических веществ в биосубстратах. В независимом аккредитованном испытательном центре ГНУ Всероссийский НИИ мясного скотоводства (аккредитация Госстандарта России – Рос. RU № 000121 ПФ59 от 19.05.2011 г.) по стандартизированным методикам был определен химический состав биосубстратов подопытных птиц. В этих образцах устанавливалось содержание сухого вещества, протеина, жира и золы, затем была рассчитана их энергетическая ценность: 1 кг протеина содержал 23,9 МДж, жира – 39,8 МДж энергии.
Статистическая обработка. Все полученные в ходе исследования данные были подвергнуты статистической обработке. Статистический анализ проводили путем сравнения опытных групп с контрольной группой, используя SPSS 19.0 программного обеспобеспечения (IBM Corporation) и Statistica 10. Значение с P0,05 считалось статистически значимым [15].
Результаты исследования и их обсуждение
Введение в рацион фитазы способствовало повышению доступности питательных веществ из корма в организм птицы. Так, увеличение живой массы является закономерным явлением, как следствие, влекущее за собой изменение мясной продуктивности птицы, выявленное нами при анализе данных, полученных после убоя подопытной птицы. Превосходство особей I опытной группы по живой массе, относительно контрольной, предопределило и высокую мясную продуктивность первых. Величина предубойной живой массы в этой группе (1994,3 г) превзошла контрольную на 3,0 % (р0,05). Тенденция увеличения данного показателя в группах с фитазосодержащими рационами сохранилась. Так, величина предубойной живой массы в III и V опытных группах превосходила уровень во II и IV группы на 2,8 и 3,8 % (р0,05), соответственно.
Данный факт наглядно демонстрирует зависимость интенсивности обменных процессов, происходящих в организме, от исследуемого кормового фактора, что подтвердилось установленным превосходством на 0,7; 0,9; 1,0 % по показателю убойного выхода в I, III, V опытных группах, относительно контрольной, II, IV групп, соответственно.
Как следует из положений, сформулированных C.Г. Сипачевым, отложение химиических веществ в теле животных после прекращения роста костей скелета происходит в мускулатуру и жир [7]. Правомерность таких предположений подтверждает проведенный нами анализ химического состава тканей тела птицы (табл. 1).
В частности, в конце учетного периода в теле бройлеров I опытной группы сухого вещества было на 2,1 % (p0,05), протеина – на 0,8 % (p≤0,05) жира – на 0,8 % – больше, чем в контрольной группе. Кроме того, в данный период в теле бройлеров III и V опытных групп сухого вещества было на 4,1 и 3,8 % (p≤0,05), протеина – на 1,1 % (p≤0,05), жира – на 2,1 и 2,1 % (p≤0,05), больше, чем во II и IV опытных группах, соответственно.
По абсолютному содержанию химических веществ в теле превосходством характеризовались бройлеры I, III и V опытных групп (табл. 2).
Таблица 1
Содержание химических веществ в теле подопытной птицы в конце эксперимента, %
Группа |
Сухое вещество |
Протеин |
Жир |
Зола |
К |
29,4±0,07 |
18,0±0,22 |
8,70±0,31 |
2,70±0,08 |
I |
31,5±0,11* |
18,8±0,19* |
9,50±0,28 |
3,20±0,05* |
II |
28,4±0,13 |
17,7±0,14 |
8,20±0,19 |
2,50±0,08 |
III |
32,5±0,12** |
18,8±0,16** |
10,3±0,16** |
2,80±0,04** |
IV |
28,0±0,16 |
17,4±0,11 |
8,00±0,10 |
2,60±0,04 |
V |
31,8±0,13*** |
19,0±0,13*** |
10,1±0,16*** |
2,70±0,09 |
Примечание. * – р≤0,05, при сравнении контрольной и I групп; ** – р≤0,05, при сравнении II и III групп; *** – р≤0,05, при сравнении IV и V групп.
Таблица 2
Содержание химических веществ в теле бройлеров, г/гол.
Группа |
Сухое вещество |
Протеин |
Жир |
Зола |
К |
574,2±60,9 |
359,0±36,7 |
163,6±17,4 |
51,6±6,71 |
I |
614,7±69,1 |
374,9±40,3 |
178,7±16,5 |
61,1±7,08 |
II |
555,0±51,6 |
353,0±46,7 |
154,2±13,5 |
47,8±2,43 |
III |
611,4±56,3 |
364,2±40,9 |
193,7±15,8 |
53,5±4,44 |
IV |
547,1±52,8 |
347,0±45,8 |
150,4±16,8 |
49,7±6,06 |
V |
620,4±58,4 |
378,9±38,9 |
189,9±18,3 |
51,6±3,33 |
Примечание. * – р≤0,05, при сравнении контрольной и I групп; **- р≤0,05, при сравнении II и III групп; *** – р≤0,05, при сравнении IV и V групп.
Так, в I и III группах происходило увеличение содержания протеина на 4,4 и 3,2 %, относительно контрольной и II групп. В V опытной группе происходило достоверное увеличение содержания протеина на 9,2 %, относительно IV опытной группы.
Выводы
Влияние ферментного препарата «Ронозим NТ (CT)» на характеристику убойных качеств и содержание химических веществ в тканях тела были продемонстрированы на модели бройлеров кросса «Смена-7». Как показывает детальный анализ химического состава тела, одной из основных причин столь специфических изменений, возможно, стало нарушение липидного обмена в организме и, как следствие, резервирование жира в теле бройлеров опытных групп.
Таким образом, наиболее выраженное действие фитазы в отношении убойных качеств и содержанию химических веществ в теле подопытной птицы выявлено в группах, получавших ферментный препарат «Ронозим NТ (CT)».
Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования (Стипендия президента СП-279.2015.4).