Анализ современного состояния мирового агропромышленного комплекса показывает, что во многих странах мира отмечается существенная деградация сельскохозяйственных земель. В результате этого процесса из мирового сельскохозяйственного оборота ежегодно выбывает в среднем 8–10 млн., а по максимальным оценкам – даже 15–20 млн. га продуктивных почв [4,9]. Особенно, деградации подвержены пастбищные земли, что связано с нерегулируемым выпасом скота и отсутствием контроля над состоянием пастбищ. Так, например, в Казахстане, большая часть пастбищ серьезно нарушена, исчезли ценные кормовые травы, почвы сильно истощены, потери гумуса в них составляют 25–30 %. Ветровой эрозии подвержены 60 % пастбищных земель, более 50 % почв в той или иной степени засолены, 26 % составляют пастбища, где изменения приобрели необратимый характер, то есть их самовосстановление невозможно или требует крупные вложения и длительный заповедный режим [1].
Одним из наиболее перспективных решений восстановления деградированных почв является использование ЭМ-технологии (технология эффективных или агрономически ценных микроорганизмов) [7]. При этом решающим фактором становится поддержание почвы в биологически активном состоянии и состоит во внесении в почву ассоциации агрономически ценных микроорганизмов или эффективных микроорганизмов (ЭМ).
Применение ЭМ-технологии для повышения плодородия истощенных и нарушенных почв основано на интродукции ассоциаций агрономически ценных микроорганизмов (ЭМ-ассоциаций) в виде суспензии клеток. В состав ЭМ-ассоциаций включают высокоэффективные микроорганизмы с полифункциональными свойствами. Обязательным условием является наличие основных групп бактерий: азотфиксирующих, целлюлолитических, фосфатмобилизующих и силикатных, выполняющих почво-восстановительную функцию. Применение ЭМ-ассоциаций улучшает почвенные процессы, способствует повышению и сохранению плодородия почв. Кроме того, микроорганизмы, входящие в состав ассоциаций, продуцируют фитогормоны, витамины, органические кислоты, антибиотики и другие биологически активные вещества, которые положительно влияют на почвенную биоту и растения фитоценозов [8,10]. Следует отметить что, несмотря на значительный интерес исследователей к вопросу о применении ЭМ-ассоциаций, в литературе мало сведений о влиянии интродукции ЭМ-ассоциаций на микрофлору деградированных почв.
Целью данного исследования было изучение влияния ЭМ-ассоциаций на изменение состава микрофлоры почв деградированных пастбищ и основных физиологических групп почвенных бактерий (азотфиксирующих, целлюлолитических и фосфатмобилизующих).
Материалы и методы исследования
Объектом исследования служила созданная нами ЭМ-ассоциация, характеризующаяся высокой ростостимулирующей активностью по отношению к луговым травам пастбищ и повышающая ферментативную активность и интенсивность дыхания почв.
В опытах использовали почву, собранную на деградированных пастбищах Илийского района Алматинской области Казахстана. В вегетационные сосуды (250 мл) со 150 г почвы вносили определенное количество клеточной суспензии ЭМ-ассоциации с титром 108кл/мл. В качестве контроля использовали почву без внесения ассоциаций. Определяли общее количество микроорганизмов, численность различных систематических групп (бактерии, актиномицеты, дрожжевые организмы и мицелиальные грибы) и качественный и количественный состав основных физиологических групп бактерий (азотфиксирующих, целлюлолитических и фосфатмобилизующих).
Общее число микроорганизмов разных систематических групп (бактерии, актиномицеты, дрожжевые организмы и мицелиальные грибы) определяли по общепринятым методикам [3]. Для изучения качественного и количественного состава основных физиологических групп бактерий использовали стандартные методы [2]. Целлюлолитические микроорганизмы выделяли на среде Гетчинсона с 1 % Na-КМЦ (водорастворимая Na-карбоксиметилцеллюлоза), азотфиксирующие – на средах Эшби, №79 и среде Омелянского, фосфатмобилизующие – на среде Муромцева.
При статистической обработке результатов находили средние геометрические логарифмы при основании два [6] с помощью программного обеспечения «Microsoft Excel 97».
Результаты исследования и их обсуждение
Ранее нами была создана ЭМ-ассоциация, в состав которой входили целлюлолитические бактерии рода Bacillus, азотфиксирующие бактерии рода Azotobacter и фосфатмобилизующие бактерии рода Bacillus. Силикатные бактерии не были включены в состав ассоциаций из-за их высокой численность в почвах деградированных пастбищ Алматинской области. ЭМ-ассоциация, характеризуется высокой ростостимулирующей активностью по отношению к луговым травам пастбищ и повышала ферментативную активность и интенсивность дыхания почв.
Модельные опыты по изучению влияния ЭМ-ассоциации на состав микрофлоры почвы проводили в лабораторных условиях в климатической камере (Constant Climate Chamber HPP-750, «Memmert», Germany). Полученные данные по влиянию внесения ЭМ-ассоциации на микрофлору деградированных почв представлены в таблице.
Из данных таблицы хорошо видно, что общее количество микроорганизмов (ОМЧ) в деградированных истощенных почвах было крайне низким и составляло 103КОЕ/г почвы. Численность бактерий составляла 103КОЕ/г почвы, актиномицетов – 102 КОЕ/г почвы, мицелиальных грибов – 2,1/103 КОЕ/г почвы. Дрожжевые организмы присутствовали в незначительном количестве и представлены единичными колониями. Эти показатели свидетельствуют о существенном обеднении почвенной микрофлоры и нарушении экологического равновесия в почвах деградированных пастбищ.
Внесение ЭМ-ассоциаций значительно активизировало микрофлору истощенных почв. Так, уже через десять суток после внесения ЭМ-ассоциаций установлено увеличение, как общего числа микроорганизмов, так и всех систематических групп микроорганизмов. Показано, что если в исходной почве численность микроорганизмов составляла 102–103 КОЕ/г почвы, то на 20 сутки после внесения ЭМ-ассоциации она возросла до 107 КОЕ/г почвы и оставалось на этом же уровне после 30 суток опыта. Содержание бактерий увеличилось на четыре порядка, численность актиномицетов – на два порядка. Количество дрожжевых организмов, которые были представлены в деградированных почвах единичными колониями, возросло до 104КОЕ/г почвы. В то же время, отмечено снижение численности мицелиальных грибов на порядок, что свидетельствует о нормализации почвенной микрофлоры.
Далее проведено изучение влияния ЭМ-ассоциации на качественный и количественный состав основных физиологических групп бактерий.
Свободноживущие азотфиксирующие бактерии присутствуют в большинстве типов почв, и их процент от общего количества микроорганизмов является индикатором ее плодородия. Результаты влияния ЭМ-ассоциации на количественный и качественный состав азотфиксирующих бактерий представлены на рис. 1.
Динамика изменения количественного состава микрофлоры деградированных почв после внесения ЭМ-ассоциации
Варианты опыта |
ОМЧ |
Бактерии, КОЕ/г почвы |
Актиноми- цеты, КОЕ/г почвы |
Дрожжи, КОЕ/г почвы |
Грибы, КОЕ/г почвы |
1 сутки |
|||||
Исходная почва |
(1,3±0,1) ×103 |
(2,4±0,2) ×103 |
(3,4±0,1) ×102 |
един. колонии |
(2,1±0,1) ×103 |
Почва+ ЭМ-ассоциация |
(1,4±0,1) ×103 |
(2,0±0,2) ×103 |
(3,5±0,1) ×102 |
един. колонии |
(2,7±0,1) ×103 |
10 суток |
|||||
Исходная почва |
(1,4±0,2) ×103 |
(2,0±0,1) ×103 |
(3,0±0,1) ×102 |
един. колонии |
(2,3±0,2) ×103 |
Почва+ ЭМ-ассоциация |
(2,9±0,8) ×105 |
(4,8±0,2) ×105 |
(1,1±0,8) ×103 |
(1,7±0,2) ×102 |
(5,5±0,3) ×103 |
20 суток |
|||||
Исходная почва |
(1,2±0,1) ×103 |
(1,9±0,1) ×103 |
(3,2±0,1) ×102 |
един. колонии |
(1,8±0,1) ×103 |
Почва+ ЭМ-ассоциация |
(8,7±0,1) ×107 |
(5,3±0,2) ×107 |
(5,1±0,2) ×104 |
(2,5±0,2) ×104 |
(6,1±0,2) ×102 |
30 суток |
|||||
Исходная почва |
(1,3±0,2) ×103 |
(2,4±0,2) ×103 |
(2,8±0,1) ×102 |
един. колонии |
(2,2±0,1) ×103 |
Почва+ ЭМ-ассоциация |
(9,9±0,5) ×107 |
(6,8±0,3) ×107 |
(5,7±0,3) ×104 |
(2,3±0,1) ×104 |
(5,8±0,1) ×102 |
Рис. 1. Динамика изменения численности азотфиксирующих бактерий после внесения в почву ЭМ-ассоциации
На рис. 1 видно, что в исходной почве численность свободноживущих азотфиксирующих бактерий была низкой и составляла 102КОЕ/г почвы, что свидетельствует о недостатке питательных веществ и условий, необходимых для развития этой группы бактерий. При внесении ЭМ-ассоциаций происходило значительное увеличение численности азотфиксирующих бактерий. Так, после десяти суток внесения ассоциации количество бактерий составляло 105КОЕ/г почвы, после 20 суток – 106КОЕ/г почвы, и оно сохранялось на том же уровне после 30 суток опыта. Установлено существенное изменение качественного состава азотфиксирующих бактерий. Так, если в исходной почве доминирующим был род бактерий Azospirillum, то при внесении ЭМ-ассоциации выявлено повышение численности не только бактерий рода Azotobacter, входящих в состав ЭМ-ассоциации, но и бактерий-азотфиксаторов родов Azomonas, Pseudomonas, Ваcillus, Acetobacter, Alcaligenes, Agrobacterium. Возрастание численности свободноживущих азотфиксаторов, изменение их таксономического состава и выявление других родов бактерий свидетельствует об интенсификации процессов распада органического вещества почвы, в том числе, почвенного перегноя, что способствует нормализации процессов азотфиксации и улучшению азотного почвенного обмена.
Целлюлоза составляет основную массу растительных остатков в почве и, в этой связи, роль целлюлолитических микроорганизмов в почвенных процессах исключительно велика. Их содержание является важным показателем плодородия почв. На рис. 2 представлены результаты по влиянию ЭМ-ассоциации на состав целлюлолитических бактерий.
На рис. 2 видно, что в исходной почве численность представителей этой группы бактерий была низкой и составляла 103 КОЕ/г почвы. После внесения ЭМ-ассоциации численность этой группы бактерий значительно возросла. Так, через десять суток после внесения ассоциации она увеличилась на два порядка, через 20 суток – на три порядка, и оставалась на том же уровне после 30 суток опыта. Исследование качественного состава показало, что в исходной почве доминирующими были два рода целлюлолитических бактерий – Bacillus и Pseudomonas, после внесения ЭМ-ассоциаций родовой состав значительно расширился, были обнаружены бактерии рода Bacterium, Cellvibrio, Cellulomonas. Увеличение численности и родового разнообразия этой группы бактерий свидетельствует о значительной активации процессов разложения целлюлозосодержащих субстратов в почве. Кроме того, эти показатели указывают на усиление интенсивности процесса почвенной гумификации и восстановление биологической активности почвы.
Важным элементом почвы является фосфор, однако, несмотря на высокое общее содержание фосфора в почвах, он преимущественно находится в малоподвижных формах. Только микроорганизмы обладают способностью мобилизовать фосфаты и обогащать почвы этим элементом. Результаты влияния ЭМ-ассоциации на изменение качественного и количественного состава фосфатмобилизующих бактерий представлены на рис. 3.
Рис. 2. Динамика изменения количества целлюлолитических бактерий после внесения в почву ЭМ-ассоциации
Рис. 3. Динамика изменения численности целлюлолитических бактерий после внесения в почву ЭМ-ассоциации
На рис. 3 видно, что исходная почва характеризуется крайне низкой численностью фосфатмобилизующих бактерий, которое составляло 101 КОЕ/г почвы. При внесении ЭМ-ассоциаций происходит значительное увеличение численности фосфатмобилизующих бактерий. Так, после десяти суток внесения ассоциации количество фосфатмобилизующих бактерий составляет 103 КОЕ/г почвы, после 20 суток – 105 КОЕ/г почвы, и сохраняется на этом же уровне после 30 суток опыта. Изучение качественного состава фосфатмобилизующих бактерий показало, что, если в исходной почве преобладал род Васillus, то после внесения ЭМ-ассоциаций родовой состав фосфатмобилизаторов изменился в сторону его расширения и были обнаружены представители родов Pseudomonas Еnterbacter, Ваcterium и Аgrobacterium.
Заключение
Показано, что внесение ЭМ-ассоциации приводит к существенному повышению общей численности микроорганизмов, изменению количественного и расширению качественного состава основных физиологических групп почвенных бактерий. Повышение численности азотфиксаторов и расширение их таксономического состава свидетельствует об усилении процессов азотфиксации и улучшении азотного обмена в почвах. Увеличение численности и расширение таксономического состава целлюлолитических бактерий свидетельствует об ускорении процессов разложения целлюлозосодержащих веществ (отмершие корни, стебли, листовой опад и др.) в почве. При этом происходит улучшение структуры почвы, увеличение содержание питательных веществ, что приводит к активации развития полезной почвенной микрофлоры и повышению ее биологической активности. Повышение численности и изменение таксономического состава фосфатмобилизующих бактерий способствует обогащению почвы растворимыми соединениями фосфора, что играет важную роль в улучшении фосфорного питания микроорганизмов почвы и высших растений.
Можно сказать, что внесение ЭМ-ассоциаций повышает содержание микроорганизмов в почве, меняет их качественный состав; нормализует микрофлору и улучшает структуру почвы, что способствует восстановлению плодородия деградированных почв.