Ранее мы сообщали о том, что у некоторых видов семейства гвоздичные (Caryophyllaceaе Juss.) впервые методом ВЭЖХ мы обнаружили экдистероиды [2, 3], хотя отдельные исследователи ранее эти соединения в данных растениях не находили. Это казалось странным, ибо представители таксона известны как богатые продуценты данных соединений [1]. Отсутствие в исследуемых видах экдистероидов может поставить под сомнение принадлежность этих растений к таксону Caryophyllaceae или точность методов исследования, на основании которых сделаны такие выводы.
Цель исследования: с помощью метода ВЭЖХ проанализировать химический состав отдельных полифенольных и экдистероидных соединений, некоторых растений семейства гвоздичных (Caryophyllaceae Juss.), у которых экдистероиды ранее не были обнаружены.
Материалы и методы исследования
Использовали растения, заготовленные в природе в момент цветения и плодоношения или гербарный материал, полученный нами из различных гербариев стран СНГ.
Химическое изучение растений проводили с помощью ВЭЖХ-спектрометрии, используя хроматограф фирмы «Gilston», модель 305, Франция; инжектор ручной, модель «Rheodine» 7125, США, с последующей компьютерной обработкой материалов исследования с помощью программы «Мультихром» для «Windows». Подвижная фаза – ацетонитрил:вода:кислота фосфорная (200:300:0,5); неподвижная фаза – металлическая колонка, размером 4,6×250 мм, Kromasil C 18, размер частиц 5 микрон; температура комнатная; скорость подачи элюента 0,5 мл/мин.; продолжительность анализа 60 мин. Детектирование проводили с помощью УФ-детектора «Gilston» UV/VIS, модель 151, при длине волны 245 нм.
Для исследования брали около 1,5 г сырья изучаемых растений, аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм по ГОСТ 214–83. Сырье помещали в колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 20 мл спирта этилового 50%, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр «синяя лента» в мерную колбу объёмом 25 мл и доводят объем до метки спиртом этиловым 50% (испытуемый раствор А).
Параллельно готовили растворы рабочих стандартных образцов в спирте 50%. По 20 мкл исследуемых растворов и растворов сравнения вводили в хроматограф и хроматографировали в вышеприведенных условиях. Для расчетов использовали метод нормировки отклика.
Результаты исследования и их обсуждение
В результате проведённого исследования растений методом ВЭЖХ нами был получен химический состав некоторых полифенольных и стероидных соединений, данные приведены на рис. 1,2,3, в таблице.
Как видно из таблицы и рис. 1–3, соединения экдистерон, полиподин В, виценин присутствуют в том или ином сочетании в растениях каждого подсемейства. При этом не было обнаружено этих соединений у H. glabra L. и A. peploides (L.) Rupr. подсемейств Paronychioideae и Alsinoideae соответственно.
Рис. 1. Хроматограмма приноготковника головчатого (Paronychia cephalotes (Bieb.) Bess.)
Рис. 2. Хроматограмма петрорагии критской (Petrorhagia cretica (L.) P.W.Ball & Heywood)
Рис. 3. Хроматограмма костенца липкого (Holosteum glutinosum (Bieb.) Fisch. et C.A. Mey.)
Результаты идентификации некоторых полифенольных и стероидных соединений растений в водно-спиртовых извлечениях, детектирование при длине волны 245 нм
|
Растение |
Виценин |
Экдистерон |
Полиподин В |
|
Алсиновые (Alsinoideae Vierh.) |
|||
|
Дивала однолетняя (Scleranthus annuus L.) |
+ |
+ |
- |
|
Песчанка волосовидная (Arenaria capillaries Poir.) |
- |
+ |
+ |
|
Костенец липкий (Holosteum glutinosum (Bieb.) Fisch. et C.A. Mey.) |
+ |
+ |
- |
|
Аммодения бутерлаковидная (Ammodenia peploides (L.) Rupr.) |
- |
- |
- |
|
Смолёвковые (Silenoideae A.Br.) |
|||
|
Смолёвка лежачая (Oberna procumbens (Murr.) Iconn.) |
- |
+ |
- |
|
Петрорагия критская (Petrorhagia cretica (L.) P.W.Ball & Heywood) |
+ |
- |
+ |
|
Смолёвка Гельманна (Otites hellmannii (Claus) Klokov) |
- |
+ |
+ |
|
Паронихиевые (Paronichioideae Vierh.) |
|||
|
Приноготковник головчатый (Paronychia cephalotes (Bieb.) Bess.) |
+ |
+ |
- |
|
Грыжник гладкий (Herniaria glabra L.) |
- |
- |
- |
|
Торица полевая (Spergula arvensis L.) |
+ |
- |
- |
Обозначения: «+» – наличие пика вещества на хроматограмме; «-» – отсутствие пика вещества на хроматограмме.
Выводы
В результате проведенного ВЭЖХ исследования нами было установлено, что растения дивала однолетняя (Scleranthus annuus L.), песчанка волосовидная (Arenaria capillaries Poir.), костенец липкий (Holosteum glutinosum (Bieb.) Fisch. et C.A. Mey.), смолёвка лежачая (Oberna procumbens (Murr.) Iconn.), петрорагия критская (Petrorhagia cretica (L.) P.W.Ball & Heywood), ушанка Гельманна (Otites hellmannii (Claus) Klokov), приноготковник головчатый (Paronychia cephalotes (Bieb.) Bess.), торица полевая (Spergula arvensis L.) содержат экдистероиды экдистерон и полиподин В, а также флавоноид виценин в том или ином сочетании в каждом подсемействе таксона.
В грыжнике гладком (Herniaria glabra L.) и аммодении бутерлаковидной (Ammodenia peploides (L.) Rupr.) данные соединения обнаружены не были.