Scientific journal
International Journal of Applied and fundamental research
ISSN 1996-3955
ИФ РИНЦ = 0,564

SОME INDIСES ОF НОMEОSTАSIS ОF АNIMАLS WITН TUMОR IN LUNGS WНEN REСEIVING АN АNTITUMОR EFFEСT WITНОUT USING СYTОSTАSTIСS АT TНE АССОUNT ОF USING ELEСTRОMАGNETОTEРАРES

Shеykо E.А. 1 Triаndаfilidi E.I. 1 Bykadorova O.V. 1
1 Rostov Research Cancer Institute of the Russian Ministry of health
Thе аim оf this wоrk wаs tо studу thе роssibilitу оf асhiеving аn аntitumоr еffесt in thе trеаtmеnt оf mаlignаnt tumоr grоwth in thе lungs thrоugh thе usе оf ехреrimеntаl еlесtrоmаgnеtоthеrару bу а соmbinаtiоn оf еffесts оn thе brаin оf lоw-intеnsitу ехtrеmеlу lоw-frеquеnсу mаgnеtiс fiеlds (SNMР) аnd skin рulsе еlесtriс fiеld withоut thе usе оf sресiаl аntiсаnсеr аgеnts. С45 аftеr tumоr trаnsрlаntаtiоn in rаt lungs fоr 4 wееks, 5 timеs а wееk in thе mоrning in thе sаmе timе аnimаls hаvе bееn subjесtеd tо еlеktrоmаgnitоthеrару. Thе сеrеbrum is ехроsеd tо thе vеrу lоw-frеquеnсу mаgnеtiс fiеlds in а disсrеtе frеquеnсу sеquеnсе 0,03 Нz-0,3Нz-9Нz with ехроsurе lеngth 5 min-1 min-1min аnd mаgnеtiс fiеld induсtiоn 5 mT-3,5 mT-2,8 mT, аftеr 20 minutеs sреnt а рulsеd еlесtriс fiеld in thе аlgоrithm оf frеquеnсiеs оf 15,3 Нz – 18,6 Нz-24,4 Нz-30,5 Нz-33,6 Нz аlоng thе sрinе аmрlitudе 135.е. thе рrоjесtiоn аrеа оf thе lungs, livеr аnd stеrnum with аn аmрlitudе оf 60.е. Using еlеktrоmаgnitоthеrару in thеsе rеgimеs lеd tо аn аntitumоr еffесt in rаts withоut thе usе оf sресifiс суtоtохiс drugs аnd iоnizing rаdiаtiоn.
Кеуwоrds: lung tumоr
ехреrimеntаl еlеktrоmаgnitоthеrару

В последнее время сверхнизкочастотное низкоинтенсивное магнитное поле (СНЧМП) и электротерапия с помощью самоконтролируемого энерго-нейро-адаптивного регулятора (СКЭНАР) широко используется с целью усиления противоопухолевого эффекта цитостатиков и повышения противоопухолевой неспецифической резистентности больного опухолью организма усиления противоопухолевого эффекта цитостатиков [1, 3, 5, 7]. Известно, что электрические импульсы, полученные от аппарата СКЭНАР, по своим характеристикам очень близки к электрическим сигналам в нервных волокнах. СНЧ МП способно влиять на системы исправляющие десинхронизацию процессов мозга, т.е. осуществлять коррекцию на уровне центральных регуляторных систем, а СКЭНАР-терапия адресована органам и тканям и определяет возможность включения периферических звеньев нейроадаптивной регуляции. Видимо, применяя такое комбинированное общее и местное воздействие, можно добиться формирования в организме опухоленосителя общих неспецифических антистрессорных реакций, оказывающих общее регулирующее и укрепляющее влияние [7]. Целью работы было определение некоторых критериев клеточного гомеостаза и изучение возможности повышения противоопухолевой резистентности и у животных с опухолью в легких без использования цитостатиков, а с помощью использования комбинированного электромагнитного воздействия СНЧМП- и СКЭНАР-терапии.

Материалы и методы исследования

Опыты были проведены на 41 белой лабораторной крысе, самцах со средней массой 250 г. Для получения модели метастаза опухоли в легком всем животным в подключичную вену была перевита взвесь клеток саркомы 45, на изотоническом растворе NаСl в объеме 0,5 мл, всего 2 млн опухолевых клеток С45[4]. Штамм С45 был получен из Онкологического Центра АМН России, г. Москва. Животные были поделены на две группы: основная группа (n = 21), в которой осуществляли только двойное воздействие физических факторов – СНЧМП и СКЭНАР без применения цитостатиков. Спустя неделю после эктопической перевивки С45 в легкое и на протяжении 5 недель опыта 4 раза в неделю в одни и те же часы утром животные основной группы (n = 21) подвергались воздействию на мозг (СНЧМП) в режиме 0,03 Гц – 0,3 Гц – 9 Гц экспозицией 5 мин – 1 мин – 1 мин индукцией 5 млТ – 3,5 мТл – 2,8 мТл, полученного от аппарата «Градиент-2». Через 20 минут после первого воздействия осуществляли второе воздействие импульсным электрическим током вдоль позвоночника с амплитудой 135 у.е., на область проекции легких, печени и грудины с амплитудой 60 у.е. и модуляции 2:1 при ежедневном изменении частоты в алгоритме частот 15,3Гц – 18,6Гц – 24.4Гц – 30,5Гц – 33.6Гц, полученного от аппарата СКЭНАР. Всего20 процедур. В Контрольной группе (n = 20) не осуществляли никаких воздействий.

Проводили цитохимическое исследование катионных белков (Кб) с помощью лизосомально-катионного теста (ЛКТ) на мазка крови [2, 8]. В препаратах крови, окрашенных прочным зеленым – азуром А, средний цитохимичесий коэффициент (ЦXК) определяли с использованием формулы Астольде и Верге (в у.е.) [2, 8]. В каждом препарате подсчитывали не менее 100 клеток. Кроме того, на этапах эксперимента было проведено гистологическое исследование тканей легких, для чего образцы фиксировали в 4 % формальдегиде 3 дня. После чего все образцы были подвергнуты рутинной гистологической обработке. Изготавливали срезы толщиной 5–3 мкм, которые окрашивали гематаксилином – эозином и анализировали под микроскопом. Изучали также показатели неспецифических адаптационных реакций, индексы интоксикации [1, 6]. Статистическую обработку проводили с использованием t критерия Стъюдента (р < 0,05).

Результаты исследования и их обсуждение

Как показали результаты наших исследований, для некоторых интегральных показателей гомеостаза, применение комбинированного электромагнитного воздействия СНЧМП- и СКЭНАР-терапии способствовало формированию и длительному поддержанию физиологических реакций антистрессорного типа [3, 7]. Подтверждением этому было значительное увеличение процентного содержания лимфоцитов в формуле периферической крови, как сигнального показателя развития общей неспецифической адаптационной реакции организма [6], а также возрастание показателей значений массы тимуса и, соответственно, уровня соотношения массы тимуса и надпочечников, что указывало на более высокую активность лимфопролиферативных процессов, коррелирующую с эффективностью применявшихся воздействий (таблица).

Показатели состояния интегральных и клеточных систем у крыс с опухолью легких на этапах электромагнитной терапии (М ± m)

Этапы

наблюдений,

недели

Содержание лимфоцитов в крови, %

Коэффициент

Тимус \надпочечник у.е.

Индексы интоксикации,

% от нормы

Частота развития антистрессорных реакций

Уровень катионных белков нейтрофиллов, у.е.

Контр.

Опыт

Контр.

Опыт

Контр.

Опыт

Контр.

Опыт

Контр.

Опыт

1-я

66,5 ± 4,4

71,0 ± 6,5

33 ± 2,4

33 ± 2,4

100

100

1,4 ± 0,1

1,6 ± 0,1

2-я

67,0 ± 4,4

48,7 ± 4,4*

4,3 ± 0,5

4,5 ± 0,1

   

55

67

1,6 ± 0,2

1,8 ± 0,1

3-я

50,2 ± 3,2

64,2 ± 5,8

3,2 ± 0,1

2,6 ± 0,2*

   

44

33

0,9 ± 0,1

1,7 ± 0,1*

4-я

40,3 ± 5,4

62,0 ± 4,6*

2,5 ± 0,9

2,7 ± 0,4

   

22

100*

0,83 ± 0,3

1,3 ± 0,2*

5-я

32,8 ± 3,5

64,0 ± 6,7*

1,9 ± 0,01

2,8 ± 0,1*

   

0

67*

0,75 ± 0,1

1,5 ± 0,1*

6-я

21,5 ± 5,7

68,2 ± 2,2*

0,7 ± 0,01

3,4 ± 0,3*

   

0

100*

0,73 ± 0,1

2,1 ± 0,04*

Примечание. Различия достоверны по отношению к Контролю Р ≤ 0,05.

Результаты гистологического анализа на заключительных этапах эксперимента показали, что при микроскопическом исследовании ткани легкого контрольной группы были обнаружены крупные очаги поражения, широкие поля кровоизлияний и присутствие в органе множественных опухолевых узлов, со средним размером 0,5–1,0 см. Инвазия опухоли обнаруживалась в основных респираторных структурах, в бронхиолах, межальвеолярных перегородках. Клетки опухоли были представлены веретиновидной, округлой и овальной формой с хорошо выраженными фигурами патологических митозов. Отмечено присутствие широких полей с кровоизлияниями. Соединительная ткань гиперплазирована, в отдельных участках органа было отмечено присутствие гистиоцитов, образующих многоядерный слой, и фибробластов. Вероятно, такая перестройка в легких контрольной группы, может быть оценена как построение клетками опухоли собственной стромы за счет материала организма-хозяина. У животных после сочетанного электромагнитного воздействия на макропрепаратах легких присутствовали лишь отдельные поля кровоизлияния, были отмечены незначительные очаги перифокального воспаления, инфильтрация соединительной тканью хорошо выражена. Крупные опухолевые узлы не были идентифицированы. В ткани легких, при микроскопии, определялись отдельные очень мелкие узлы с измененными опухолевыми клетками, теряющими веретенообразную форму и отростки. Для таких клеток были характерны следующие дистрофические изменения: наличие в цитоплазме крупных вакуолей, в ядрах гипохромия или беспорядочно лежащая хроматиновая сеть. На некоторых препаратах были отмечены поля с кариорексисом, кариопикнозом и лизисом опухолевых клеток С45.

В таблице представлены основные результаты наших исследований в том числе данные метаболического состояния нейтрофилов при цитохимическом исследовании Кб с помощью лизосомально-катионного теста (ЛКТ) [2]. Из таблицы следует, что с третьей недели эксперимента значения ЛКТ в опытной группе были достоверно выше. На завершаемом этапе эксперимента, уровень Кб был в 2,8 раз выше, чем в контроле, что свидетельствует о влиянии электромагнитотерапии на состояние кислородзависимых механизмов бактерицидности и интенсификации интенсивности «дыхательного взрыва» в нейтрофилах крови животных этой группы. Так как из данных литературы известно, что повышение неспецифической противоопухолевой резистентности как правило, сопровождается мобилизацией клеточного звена естественной противоопухолевой резистентности организма, проявляющейся в увеличении числа и качества нейтрофилов с более высоким уровнем содержания показателей КБ [8], что вполне согласуется с нашими данными и подтверждает этот постулат. Полученные значения тестов интоксикации по Яблучанскому и Кальф-Калифу в этой группе не отличались от показателей нормы (до 100 % уровня значений, соответствующих норме) особенно в период 6-й недели опыта (см. таблица), что косвенно свидетельствует о повышении уровня неспецифической резистентности. В основной группе также достоверно возрос процент животных, у которых на этапах лечения была сформирована неспецифическая антистрессорная реакция, а к концу эксперимента эта цифра составила 100 % (таблица).

Можно констатировать, что наблюдаемые нами деструктивные изменения в структуре опухолей легких (кариопикноз, кариорексис, лизис ядер и клеток опухоли, инфильтрация соединительной тканью, активация нейтрофильного звена и других лимфоцитарных элементов иммунной системы животного) являются следствием как минимум двух причин. Во-первых: локального повышения противоопухолевой резистентности, связанного с эффекторными механизмами клеточной резистентности; во-вторых: следствием, сформированных на уровне всего организма общих неспеци-
фических адаптационных реакций антистрессорного типа

Заключение

Применение в качестве сочетанного электромагнитного воздействия на мозг низкоинтенсивного СНЧМП и СКЭНАР-терапии на определенные зоны туловища животных позволяет без применения цитостатиков получить противоопухолевый эффект в легком в виде регрессии крупных опухолевых узлов или стабилизации метастатического роста. Такое воздействие оказывает выраженное антистрессорное, самоорганизующее системное влияние, присущее неспецифическим реакциям антистрессорного типа, сопровождается повышением неспецифической противоопухолевой резистентности и интенсификацией метаболических процессов в нейтрофилах крови.