Исследование проводилось на белых беспородных крысах, самцах, массой 180-200 г. Животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных». Для оценки плазменного гемостаза коагулометрическим методом с помощью аппарата «Solar» определяли: протромбиновый индекс (ПТИ, %), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ, с), содержание фибриногена по Clauss, парус-тест для скрининга нарушений в системе протеина С с вычислением нормализованного отношения (МНО). Все тест-системы для изучения плазменного звена гемостаза были производства фирмы «Ренам». Также оценивали количественный уровень тромбоцитов и эритроцитов. Изменение конформации гемопорфирина гемоглобина исследовали на рамановском спектрометре in via Basis фирмы Renishaw с короткофокусным высокосветосильным монохроматором (фокусное расстояние не более 250 мм). Для возбуждения рамановских спектров использовался лазер (длина волны излучения 532 нм, мощность излучения 100 мВт, объектив 100х).
Результаты наших исследований показали изменение показателей системы гемостаза после внутрибрюшинного введения нитроглицерина (1 мг/кг) через 30 мин по отношению к контрольной группе. Так, в крови уровень фибриногена и МНО в системе протеина С снижаются на 43,5 % и 45 % соответственно. При этом увеличивается число тромбоцитов на 54 %. Содержание в крови эритроцитов в пределах контрольных значений и составляет 3,41 ± 0,05 х 1012/л. ПТИ и АЧТВ увеличиваются соответственно на 65 % и 9,5 %. Наблюдается сильная прямая корреляционная зависимость между содержанием в крови тромбоцитов и протромбиновым индексом (r = 0,65; р < 0,05). Имеется сильная обратная корреляционная связь МНО с содержанием в крови тромбоцитов (r = -0,91; р < 0,05) и протромбиновым индексом (r = -0,73; р < 0,05). Относительное количество оксигемоглобина в суспензии эритроцитов, определяемое по соотношению интенсивностей I1375/(I1355+I1375), уменьшается на 12 %. Интенсивность соотношения пиков полос КР I1355/I1550, отражающее относительную способность всего гемоглобина в пробе связывать лиганды, увеличиваются на 9 %, а соотношение I1375/I1580, показывающее относительную способность гемоглобина выделять лиганды, уменьшается на 70 %. Сродство гемоглобина к лигандам, выявляемое по отношению интенсивностей (I1355/I1550)/(I1375/I1580), увеличивается в 2,1 раза по отношению к контрольной группе. Информация о выраженности симметричных и асимметричных колебаний пиррольных колец, определяемая по отношению интенсивностей I1375/I1172, составляет 2,18 ± 0,39 отн. ед., что выше контрольных значений на 23 % и может быть связано с конформационными изменениями пирролов.
Через 24 часа после внутрибрюшинного введения нитроглицерина (1 мг/кг) наблюдается снижение в крови уровня фибриногена и МНО соответственно на 49 % и 20 % по отношению к контрольной группе. АЧТВ продолжает резко повышаться (в 2,6 раза) и составляет 73 сек. При этом протромбиновый индекс увеличивается на 30 %. Число тромбоцитов в крови увеличивается на 10 % по отношению к контролю (137,5 ± 3,28 х 10 9/мл). Число эритроцитов в крови крыс в пределах нормы и составляет 3,23 ± 0,09 х 1012/л. Наблюдается сильная прямая корреляционная зависимость между содержанием в крови эритроцитов с уровнем тромбоцитов (r = 0,98; р < 0,05) и протромбином (r = 0,68; р < 0,05). Имеется сильная прямая корреляционная связь между уровнем тромбоцитов в крови и ПТИ (r = 0,70; р < 0,05), а также сильная обратная связь между АЧТВ и уровнем тромбоцитов (r = -0,60; р < 0,05). Имеется сильная обратная корреляционная зависимость АЧТВ от МНО (r = -0,62; р < 0,05) и количества фибриногена в крови (r = -0,61; р < 0,05). Относительное количество оксигемоглобина в суспензии эритроцитов уменьшается на 8 %. Способность всего гемоглобина в пробе связывать лиганды не изменяется, а выделять лиганды уменьшается на 71 %. При этом сродство гемоглобина к лигандам увеличивается в 2,2 раза по отношению к контрольной группе. Информация о выраженности симметричных и асимметричных колебаний пиррольных колец, определяемая по отношению интенсивностей I1375/I1172, составляет 1,48 ± 0,26 отн. ед., что ниже контрольных значений на 17 %.
Таким образом, при однократном внутрибрюшинном введении нитроглицерина (1 мг/кг) через 30 мин и 24 часа наблюдаются изменения в системе гемостаза, проявляющиеся в снижении уровня фибриногена и увеличении протромбинового индекса и активированного частичного тромбопластинового времени. Снижается относительное содержание оксигемоглобина в эритроцитах. При этом увеличивается сродство гемоглобина к лигандам и способность всего гемоглобина связывать линагды на фоне уменьшения способности гемоглобина выделять лиганды.