Целью исследования была оценка уровня интерлейкина-10 (ИЛ-10) в сыворотке крови лабораторных крыс с моделью ишемического инсульта.
Материалы и методы. Эксперименты проведены на 130 белых нелинейных крысах-самцах, средней массой – 250±50 гр., под общим золетил-ксилазиновым наркозом. Моделирование острой локальной церебральной ишемии выполнялось путем коагуляции правой средней мозговой артерии (ПСМА) [1]. Животные были разделены на 4 группы: 1 (контрольная) (n=10) – крысы, операция которым не выполнялась; 2 (n=40) – крысы, которым выполнялась коагуляция ПСМА без последующего проведения ТЭС-терапии; 3 (n=40) – крысы, которым проводился сеанс ТЭС-терапии, затем выполнялась коагуляция ПСМА; 4 (n=40) – крысы, которым выполнялась коагуляция ПСМА, и после этого проводилось 7 сеансов ТЭС-терапии. Забор крови и оценку уровня ИЛ-10 во всех группах животных проводили на 1, 3, 7 и 14 сутки. Количественное определение ИЛ-10 проводили иммуноферментным методом с помощью набора «Ray Biotech, Inc.», (Германия). Исследования проведены на базе ЦНИЛ Отдела клинической экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии ГБОУ ВПО КубГМУ Минздрава России.
Результаты исследования и обсуждение. Содержание ИЛ-10 в 1 группе животных составило 1,22±0,67 пг/мл. Во 2-й группе после моделирования ИИ его уровень составил 39,79±10,77 пг/мл, что было достоверно (p≤0,01) выше (в 32,6 раза) его содержания у животных 1 контрольной группы. Это свидетельствует об одновременной (с противовоспалительным) активации и противовоспалительного звена при ишемическом повреждении мозга. На 3 сутки его уровень достигал 49,86±11,68 пг/мл. Это также было достоверно (p≤0,05) по отношению к животным контрольной группы, но не достоверно (p≥0,05) по отношению к уровню ИЛ-10 в 1 сутки у животных той же группы. На 7 сутки уровень ИЛ-10 достоверно (p≥0,05) повысился (в 1,6 раза) по отношению к 3 суткам и составил 78,7±8,79 пг/мл. В пределах указанной группы содержание ИЛ-10 был достоверно (p≤0,01) повышено по сравнению с 1 сутками, а также контролем. Наконец, на 14-е сутки наблюдения уровень ИЛ-10 составил 46,48±10,68 пг/мл, что было достоверно (p≤0,01) ниже (в 1,7 раза), чем на 7 сутки. Таким образом, содержание ИЛ-10 вернулось к уровню 1 суток той же группы. Однако по отношению к контролю оставалось достоверно (p≥0,05) повышенным (в 38,1 раза). Итак, в условиях ишемического инсульта противовоспалительная активность достаточно высока в течение первых 7 суток.
В 3 группе животных, которым ТЭС-терапия проводилась перед моделированием ИИ, динамика уровня ИЛ-10 имела отличия. В 1 сутки его уровень составлял 49,56±8,98 пг/мл. Это было достоверно (p≤0,01) выше (в 40,6 раза) по отношению к животным контрольной группы, но не достоверно (p≥0,05) к аналогичному показателю у животных 2 группы. На 3 сутки его уровень составил 84,33±35,88 пг/мл, что также было достоверно (p≤0,01) выше (в 69,1 раза) контроля и по отношению к 1 суткам (в 1,7 раза) в пределах данной группы, а также 3 суткам у животных 2 группы (в 1,7 раза). Такая же ситуация сохранялась и на 7 день наблюдения. Уровень ИЛ-10 составил 85,04±5,77 пг/мл. В пределах исследуемой группы этот показатель достоверно (p≤0,05) высок (в 1,7 раза) по отношению к 1 суткам и не имел достоверных (p≥0,05) отличий от уровня 3 суток (в той же группе) и, отмеченного у животных 2 группы на 7 сутки. Наконец, на 14 сутки его содержание составило 76,52±11,73 пг/мл. Некоторое снижение уровня ИЛ-10 не было достоверным (p≥0,05) по отношению к показателю, наблюдаемому на 3 и 7 сутки в этой же группе. Однако содержание ИЛ-10 в 3 группе был достоверно (p≤0,05) выше (в 1,6 раза) аналогичного показателя (46,48±10,68 пг/мл) у животных 2 группы в те же сроки. Таким образом, уровень ИЛ-10 достоверно повысившись по отношению к контролю (p≤0,01) и к 1 суткам в пределах группы (p≤0,05), оставался высоким в течение всего периода наблюдения за животными. Таким образом, проводимая ТЭС-терапия предупреждает снижение уровня ИЛ-10 весь период наблюдения за животными (до 14 суток) и позволяет удерживать его на достаточно высоких значениях.
Рассмотрим динамику содержания ИЛ-10 в 4 группе животных, которым ТЭС-терапию проводили сразу же после моделирования ИИ и в течение последующих 6 суток. Уже в 1 сутки уровень этого цитокина составил 68,23±9,43 пг/мл, что было достоверно (p≤0,05) выше (в 55,9 раза) контроля и достоверно (p≤0,05) выше показателя в 1 сутки у животных 2 и 3 группы (в 1,7 раза
и в 1,4 раза соответственно). На 3 сутки содержание ИЛ-10 составило 101,45±17,41 пг/мл. Это повышение было достоверно (p≤0,01) по отношению к контролю (в 83,2 раза) и по отношению к 3 суткам животных 2 и 3 группы (в 2,0 раза и в 1,2 соответственно). Достоверным (p≤0,05) это повышение было также и по сравнению с 1 сутками для животных той же группы (в 1,3 раза).
На 7 сутки содержание ИЛ-10 было 92,41±9,48 пг/мл. Этот уровень изменился недостоверно (p≥0,05) по отношению к показателю 3 суток в пределах группы. Однако по сравнению с контролем и уровнем его в 1 сутки у животных той же группы уровень ИЛ-10 оставался достоверно (p≤0,01) выше (в 75,7 раза и в 1,4 раза соответственно). На 14 сутки уровень ИЛ-10 составлял 72,48±9,47 пг/мл. Это изменение было недостоверным (p≥0,05) по отношению к показателю 1 суток (вернулось к уровню 1 суток), но по отношению к контролю, аналогичному показателю у животных 2 группы и содержанию ИЛ-10 на 3 и 7 сутки в этой же группе животных было достоверно (p≤0,01) выше. Таким образом, применение ТЭС-терапии обеспечивает поддержание достаточно высокого уровня ИЛ-10. Этот факт свидетельствует о возможности применения этого метода в острейший период ИИ.