Несмотря на наличие ряда лекарственных средств, влияющих на процесс репарации, проблема органотопической регенерации кожи остается весьма актуальной ввиду частой встречаемости ее обширных повреждений, имеющих, как правило, необратимый характер. Это обусловливает необходимость более глубокого изучения процессов органотопической регенерации кожных покровов и поиска новых эффективных путей ее стимуляции. Одним из таких методов лечения потенциально способна стать ТЭС-терапия в связи с ее выраженными антистрессорными, иммуномодулирующими, противовоспалительными и анальгетическими свойствами, обусловленными эффектами высвобождающихся опиоидных пептидов [1–6, 9, 10].
Цель работы – изучение влияния ТЭС-терапии на репаративную регенерацию раневого дефекта кожи у крыс.
Материалы и методы исследования
Исследование проведено в лаборатории кафедры общей и клинической патофизиологии ГБОУ ВПО КубГМУ. Эксперименты проведены на 20 белых нелинейных крысах-самцах средней массой 200 ± 30 г. Животных разделили на 2 группы (контрольная и опытная), по 10 особей в каждой. Содержание животных и проведение экспериментов соответствовали требованиям приказов № 1179 МЗ СССР от 11.10.1983 года и № 267 МЗ РФ от 19.06.2003 года, а также международными правилами «Guide for the Care and Use of Laboratory Animals». Экспериментальные оперативные вмешательства проводились с использованием общего обезболивания по следующей схеме: золетил 3 мг/кг в/м («Virbac», Франция), ксиланит 8 мг/кг в/м (ЗАО «НИТА-ФАРМ», Россия, г. Саратов), атропина сульфат 0,1 мг/кг п/к [7–9]. Наркоз верифицировали по исчезновению реакции на болевые раздражители (укол лапы) и угнетению роговичного рефлекса. У всех экспериментальных животных (контрольной и опытной групп) моделировали раневой дефект методом иссечения кожного лоскута площадью 1000 мм2 в межлопаточной области.
В опытной группе крыс после воспроизведения раневого дефекта кожи в течение 7 дней проводилась ТЭС-терапия с использованием аппарата «ТРАНСАИР – 03». Стимуляция проводилась в анальгетическом режиме, длительность первого сеанса составляла 15 минут, всех последующих – 30 минут.
Динамику процесса заживления оценивали путем фотографирования ран с помощью цифровой камеры с последующим анализом изображений [10]. Измерение площади поверхности раны проводилось на 1, 3 и 7 сутки с момента воспроизведения патологии.
На 3 сутки эксперимента у двух крыс из каждой группы был выполнен забор участка раны на границе с неповрежденной тканью. Образец подвергался фиксации в 10 % нейтральном забуференном фосфатами формалине. Выполнялась проводка образцов через изопропанол-минеральное масло с последующей заливкой в парафин. Окрашивание микропрепаратов осуществляли гематоксилином и эозином [7]. Полученные в исследуемых группах результаты после статистической обработки выражали в виде средних значений (М) и ошибки среднего (m). Достоверность различий между сравниваемыми группами проверялась с помощью критерия Манна-Уитни (p ≤ 0,05).
Результаты исследования и их обсуждение
Случаев незапланированной гибели и осложнений у животных не было. Получавшие ТЭС-терапию крысы лучше переносили послеоперационный период.
На первые сутки эксперимента статистически значимых изменений площадей ран у крыс контрольной и опытной групп не отмечалось. Визуально, начиная со вторых суток, раневой дефект был прикрыт коркой.
На третьи сутки эксперимента площадь раны у крыс в контрольной группе составила 782 ± 32 мм2, а в опытной – 630 ± 25 мм2, что на 19,4 % достоверно меньше (p ≤ 0,05). Кроме того, с третьих суток наблюдались процессы эпителизации раневого дефекта: последовательно, начиная от краев к центру. В опытной группе животных по сравнению с контрольной процессы эпителизации были выражены интенсивнее, а продуктивный компонент воспаления (грануляции) слабее.
На седьмые сутки эксперимента площадь раны у крыс контрольной группы составила 224 ± 25 мм2, а опытной – 120 ± 16 мм2, то есть на 46,4 % достоверно меньше (p ≤ 0,05). Также к 7 суткам у животных, получавших ТЭС-терапию, отмечалось очищение раны от струпа, края ран выравнивались, приобретали розовую окраску, гиперемия и отек вокруг дефекта не обнаруживались, регенерирующий эпителий покрывал всю область бывшей раны. В контрольной группе подобные изменения наблюдались только на десятые сутки от начала эксперимента.
Выводы
В результате проведенных исследований установлено, что ТЭС-терапия ускоряет заживление и благоприятно влияет на состояние поврежденного участка кожного покрова у крыс. В перспективе можно рекомендовать данный метод для использования в практической медицине с целью стимуляции процессов регенерации при обширных раневых дефектах кожи