Расширение ассортимента современных эффективных и безопасных лекарственных препаратов может быть достигнуто с внедрением в отечественную медицинскую практику лекарственных средств природного и особенно растительного происхождения [1].
Среди многочисленных проблем современного общества одно из ведущих мест занимает психоэмоциональный стресс. Это эмоциональное напряжение обусловлено, как правило, социальными конфликтами.
Поэтому своевременный прием седативных лекарственных препаратов не только повышает качество жизни, но и препятствует развитию соматической патологии. Среди лекарственных средств, используемых для коррекции психоэмоционального состояния, особенно привлекательны растительные модели, так как они чаще всего отпускаются без рецепта.
В ряду седативных средств, имеющихся на Российском фармацевтическом рынке 70 % растительного происхождения. Однако почти все они имеют моносостав, хотя на наш взгляд, комплексность для препаратов такой направленности действия, может оказаться перспективной [2].
В качестве сырьевых объектов наше внимание привлекли: трава пустырника – Herba Leonuri. Производящие растения: пустырник пятилопастный (пустырник волосистый) – Leonurus quinquelobatus Gilib., пустырник сердечный (пустырник обыкновенный) – Leonurus cardiaca L., семейство Яснотковые (Губоцветные) – Lamiaceae (Labiatae) [3].
Сырье содержит иридоиды, среди которых доминируют гарпагид, ацетилгарпагид, аюгол, аюгозид, галиридозид, обусловливающие седативный эффект и горький вкус препаратов. Второй группой биологически активных соединений являются флавоноиды, среди которых наиболее характерны производные кверцетина (рутин, изокверцитрин, кверцитрин, гиперозид) и апигенина (космосиин, квинквелозид – соединение апигенина с глюкозой и п-кумаровой кислотой), а также 5,4’-дигидрокси-7-метоксифлавон. К сопутствующим веществам относятся кофейная кислота, 4-О- рутинозид, дубильные вещества (около 4-5 %), азотсодержащие соединения (стахидрин, холим), витамин С, следы эфирного масла (около 0,03-0,25 %). Терпеноиды представлены сапонинами (урсоловая кислота) и дитерпеноидами (фитол, леокардин) [3].
В отношении второго объекта – корневища с корнями синюхи – Rhizomata cum radicibus Polemonii. Производящее растение – синюха голубая (синюха лазоревая) – Polemonium coeruleum L., семейство Синюховые – Polemoniaceae [4].
Сырье содержит тритерпеновые сапонины (20-30 %), представленные производными группы β-амирина – полемонозидами [4].
Установлено, что агликоны (сапогенины) полемониозидов содержат в себе преимущественно эфиры высоко-гидрокенлированиых тритерпеновых спиртов (лонгиспиогенол, ARl-барригенол, Rl-баррнгенол, камеллиагенин Е и др.) и уксусной, тиглиновой, ангеликовой, a-метилмасляной, пропионовой и изобутиловой кислот. Кроме того, в сырье содержатся смолы, органические кислоты, кумарины, флавоноиды, жирное масло, крахмал.
Сапонины синюхи обладают высокой гемолитической активностью – для корней и корневищ гемолитический индекс достигает 11000; у травы этот индекс не превышает 1000, у семян – 3000 и исключительно высок у отдельных фракций чистой суммы сапонинов – до 100000–200000 [4].
Что касается корней шлемника байкальского – Radices Scutellariae baicalensis: производящее растение – шлемник байкальский – Scutellaria baicalensis Georgi., семейство Яснотковые (Губоцветные) – Lamiaceae (Labiatae).
Сырье содержит флавоноиды группы флавонов (до 10 %) байкалеин (5,6,7-триоксифлавон), байкалин (7-О-глюкуронид байкалеина), скутеллареин (5,6,7,4-тетраоксифлавон) скутелларин (7-О-глюкуронид, скутеллареина), а также другие флавоны – вогонин, ороксилин. К сопутствующим веществам шлемника относятся дубильные вещества конденсированной группы (до 2,5 %), эфирное масло, смолы [5].
Основной фармакологической направленностью перечисленных объектов является их выраженное седативное действие.
Ранее было доказано, что доминантным веществом данного многокопонентного фитоэкстракта, полученного фильтрационной экстракцией, является байкалин.
Цель исследования: установить количественное содержание байкалина в комплексном фитоэкстракте методом ВЭЖХ.
Материалы и методы исследования
Хроматографирование проводили с использованием системы для высокоэффективной жидкостной хроматографии Стайер фирмы «Аквилон», с колонкой Luna С 18 «Phenomenex, USA», с содержанием углерода около 16 %. Размер колонки 150x4,6 мм. Ввод пробы объемом 20 мкл осуществлялся с помощью петлевого дозатора. Элюирование проводили в градиентном режиме. Элюент А – ацетонитрил, элюент B – 0,05М раствор кислоты фосфорной. Содержание ацетонитрила увеличивалось от 5 % до 60 % за 40 мин, при расходе подвижной фазы 1мл/мин. Детектирование осуществляли при 280 нм.
Приготовление стандартного образца байкалина (Sigma Aldrich). 0,0058г байкалина помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл с добавлением 10 мл 70 % этанола, после растворения доводили до метки тем же растворителем.
Приготовление исследуемого образца: 50 мкл комплексного извлечения доводили 70 % спиртом до 1000 мкл (разведение 1:20).
Результаты исследования и их обсуждение
Было установлено, что количественное содержание байкалина в комплексном извлечении составляет 0,73 %.
Рис. 1. Хроматограмма стандарта байкалина
Рис. 2. Хроматограмма комплексного извлечения
Заключение
Таким образом впервые предложено использовать комплексное извлечение шлемника байкальского корней, синюхи голубой корневищ с корнями, пустырника травы в качестве седативного средства, определено количественное содержание байкалина в данном извлечении методом ВЭЖХ. Оно составило 0,73 %.