Биогенные амины являются одним из ведущих звеньев в цепи факторов гуморальной регуляции, как общего, так и местного гомеостаза. Овариальный цикл у женщин характеризуется постоянным изменением гормонального статуса, при этом биогенные амины, как на центральном, так и на периферическом уровне осуществляют его тонкую регуляцию. Кроме того, в течение всей жизни биогенные амины участвуют в поддержании адаптационно-компенсаторных реакций [1]. Установлено, что содержание в периферической крови таких БА как серотонин и гистамин непостоянно, в течении овуляторного цикла и может отражать морфофункциональное состояние органов репродуктивной системы при фазовых переходах организма на новые уровни гомеостаза [3].
Репродуктивная функция женского организма осуществляется, прежде всего, благодаря яичникам и матке. Половые гормоны, биогенные амины и другие, биологически активные вещества, синтезируемые яичниками, влияют на органы мишени, одним из которых является матка. В настоящее время общепризнанно, что тучные клетки являются посредниками между нервной и гуморальной системами организма с одной стороны и «рабочими» клетками органов – с другой. Поглощая невостребованные биогенные амины, транспортируя и инактивируя их, тканевые базофилы являются регуляторами биоаминового обмена в организме [2]. Дисбаланс концентраций моноаминов может быть одной из причин патологии органов женской репродуктивной системы [3].
В экспериментальных и клинических исследованиях установлена патогенетическая значимость изменения уровня биогенных аминов и активности ферментов их метаболизирующих при развитии злокачественных опухолей [4,7].
Гистерэктомия (ГЭ) у женщин репродуктивного возраста, при доброкачественных заболеваниях матки, неизбежно приводит к гормональным нарушениям и усугублению климактерических расстройств. Патогенетические изменения, связанные с гистерэктомией, выражаются в нарушении анастомозов между яичниковой и маточной артерией, нарушением кровоснабжения гонад, а также утрате рецепторных образований матки, участвующей в сложных нейроэндокринных взаимодействиях в системе гипоталамус-гипофиз-яичники-кора надпочечников-щитовидная железа [5]. И, несмотря на то, что многочисленные исследования доказывают увеличения риска возникновения разнообразных патологий у женщин с удаленной маткой, роль гистрэктомии в последующем опухолевом росте в яичниках остается не выясненной. Таким образом, учитывая отсутствие сведений о состоянии нейрогуморальной системы у пациенток с оставленными после ГЭ яичниками, а так же роли удаленного органа – мишени в последующем неопластическом росте яичников представляет интерес изучить содержание биогенных аминов и аминоксидаз в условно интактной и опухолевой ткани яичников в зависимости от наличия или отсутствия матки.
Материалы и методы исследования
Обследованы 49 пациенток с доброкачественными и злокачественными образованиями яичников, с наличием или отсутствием матки в возрасте от 48 до 75 лет. Средний возраст больных составил 58,3±1,2 года, все женщины находились в менопаузе разного срока длительности. В качестве условно здоровой ткани яичников исследовали визуально не измененные гонады, удаленные при операции по поводу фибромиомы матки у 21 женщины. В группу с доброкачественными образованиями придатков вошли 23 женщины, оперированных по поводу кист яичников без малигнизации, из них 12 пациенток с кистами на фоне матки, а 11 – с кистами яичников, оставленных после ГЭ. В группы со злокачественными образованиями яичников вошли 16 пациенток больных раком яичников (РЯ) III-IV стадии, при сохраненной матке и 10 больных раком яичников, оставленных после гистерэктомии. Гистологическое строение опухоли цистаденокарцинома. Во всех группах с помощью методов ИФА определяли концентрацию гистамина, серотонина (5НТ), его метаболита 5-оксииндолуксусную кислоту (5ОИУК) и мелатонина (IBL, Германия) в 10% цитозольных фракциях тканей яичников, приготовленных на 0,1М калий фосфатном буфере рН 7.4, содержащим 0,1% Твин 20 и 1% БСА. Ферментативную активность моноаминоксилазы типа А (МАО-А) и диаминоксидазы (ДАО) в гомогенатах тканей яичников определяли по методу Сиворакша Г.А. и Сидельниковой Ю.Н. [6]. Все женщины дали добровольное согласие на использование удаленного во время операции материала в научных целях.
Статистический анализ результатов проводили с помощью пакета Statistica 6,0 (Stat-Soft, 2001). Оценка достоверности произведена с использованием t-критерия Стьюдента. Уровень Р<0,05 принимали как значимый.
Результаты исследования и их обсуждение
Результаты исследования показали (таблица), что содержание тканевого серотонина у пациенток с доброкачественными образованиями яичников (кистами) как возникшими в оставленных после ГЭ яичниках, так и при наличии матки, не отличалось от такового в интактных яичниках. Содержание 5ОИУК не отличалось от здоровой ткани в кистозном яичнике при наличии матки, однако в случае образования кисты в оставленных после ГЭ яичниках, уровень метаболита был достоверно снижен: в 1,4 раза, по сравнению с не измененной тканью, и в 1,3 раза по сравнению с показателями в кисте, резвившийся на фоне матки.
При злокачественном опухолевом росте локальная концентрация 5НТ снизилась в 1,5 раза в случае первичного рака и в 3,5 раза при раке яичников оставленных после гистерэктомии. При этом уровень серотонина в яичниках после ГЭ был в 2,3 раза ниже, чем в гонадах функционирующих совместно с маткой. У большинства пациенток с первичным РЯ в опухоли уровень 5ОИУК был снижен в 1,7 раз, также как и при раке на фоне ГЭ.
Содержание биогенных аминов и активность аминоксидаз в ткани яичников
|
Группы |
Серотонин (мкг/г ткани) |
5ОИУК у.е |
Мелатонин (нг/г ткани) |
Гистамин (мкг/г ткани) |
МАО-А (нмоль/мг белка/мин) |
ДАО (нмоль/мг белка/мин) |
|
интактные яичники n=30 |
0,21±0,01 |
1133±60 |
27,3±1,75 |
0,34±0,05 |
11,65±1,0 |
9,91±1,07 |
|
кистозные яичники n=12 |
0,19±0,01 |
1033±74 |
24,6±1,35 |
1,42±0,121,2 |
20,64±1,81 |
14,9±2,431,2 |
|
киста оставленных после ГЭ яичников n=10 |
0,23±0,02 |
821±401 |
14,7±1,11 |
0,7±0,061 |
24,4±2,11 |
7,67±1,79 |
|
первичный РЯ n=16 |
0,14±0,011,2 |
673±38,91 |
16,6±1,31,2 |
0,21±0,011 |
29,3±2,21 |
34,2±3,41,2 |
|
РЯ оставленных после ГЭ n=10 |
0,06±0,0051 |
669,5±28,51 |
28,5±1,5 |
0,17±0,011 |
26,3±1,871 |
4,64±0,501 |
Примечание. 1 – отличие от интактных яичников достоверно (р<0,050,001); 2 – отличие от группы с аналогичной патологией развивающейся в яичниках после ГЭ (р<0,050,001).
Известно, что в норме серотонин дезаминируется МАО-А до 5ОИУК, однако субстратная специфичность аминоксидаз зависит от многих факторов, в том числе от содержания кислорода в тканях. В кисте яичника было выявлено повышение активности МАО-А в 1,8 раз. Так как при этом концентрация серотонина и его конечного метаболита 5ОИУК в ткани не изменилась, по сравнению с интактными яичниками, мы можем предположить, что произошло нарушение субстратной специфичности фермента.
У большинства пациенток с кистами оставленных после ГЭ яичников активность тканевой МАО-А также оказалась повышенной более чем в 2 раза, по сравнению с показателями в интактной ткани. Повышение активности фермента было отмечено на фоне не изменившейся концентрации серотонина и снизившейся – 5ОИУК, что также свидетельствует о том, что повышение активности МАО-А имело точкой приложения другой субстрат.
Как при первичном РЯ, так и при злокачественных опухолях в яичниках, возникших после ГЭ, активность МАО-А была выше, чем в интактных яичниках в 2,3-2,5 раза. Однако повышение активности МАО-А сопровождалось снижением не только серотонина, но и его метаболита 5ОИУК.
Содержание мелатонина в ткани кисты не отличалось от показателей в здоровых яичниках, однако в кистах, образовавшихся после ГЭ, мы отметили снижение данного показателя в 1,9 раза, по сравнению со интактной тканью и в 1,8 раза по сравнению с кистозной тканью при наличии матки. При этом, у большинства больных РЯ при наличии матки, концентрация данного индола была снижена в 1,6 раза, по сравнению с показателями в интактных яичниках.
Однако когда РЯ развивался после гистерэктомии, изменений в содержании тканевого мелатонина не выявлено.
Концентрация гистамина в кистозном яичнике оказалась повышена более чем в 4 раза по сравнению с нормальной тканью. При этом активность ДАО была повышена в 1,4 раза. При кистозном поражении оставленных после ГЭ яичников количество гистамина в ткани так же было повышено почти в 2 раза, а ферментативная активность ДАО оставалась в пределах нормы.
Первичный рак яичников характеризовался сниженным содержанием гистамина в опухолевой ткани и повышенной активностью ДАО (в 3 раза, по сравнению с интактными яичниками). В ткани злокачественной опухоли оставленного после ГЭ яичника на фоне сниженного в 2 раза уровня гистамина мы отметили и снижение активности ДАО более чем в 2 раза.
Таким образом, отличительной особенностью злокачественной опухоли была тканевая серотониновая недостаточность, наиболее выраженная при развитии процесса в оставленных после гистерэктомии яичниках, с повышением активности МАО и снижение диамина гистамина с разнонаправленным изменением активности ДАО в зависимости от наличия матки. Подобные изменения в системе биогенных аминов оказывают выраженное влияние на гормоногенез организма женщин.