Scientific journal

International Journal of Applied and fundamental research

ISSN 1996-3955

ИФ РИНЦ = 0,593

В свете современных представлений, нейтрофильные гранулоциты (НГ) являются полипотентной популяцией клеток иммунной системы (ИС), относящейся к врожденному иммунитету, обладающей важными функциональными возможностями, которые позволяют активировать и регулировать адаптивный иммунитет, способствуя его полноценной реализации [3].

В процессе формирования иммунная система переживает ряд физиологических периодов, по мнению ряда авторов являющихся «критическими», характеризующихся максимальным риском возникновения инфекционных патологий и обусловленных недостаточностью функций иммунитета. Окончательно выравнивание всех систем иммунорегуляции с выходом на «взрослый» фенотип происходит не ранее 16 – 18 летнего возраста [2, 3].

Хирургические вмешательства, наркоз, металлоконструкции, сопутствующая фармакотерапия, несомненно, оказывают негативное воздействие на не успевшую окончательно сформироваться иммунную систему ребёнка. При этом сведений о влиянии возрастного фактора на показатели врождённого иммунитета у детей и подростков при проведении хирургических вмешательств на скелете в доступной литературе мы не встретили.

Цель исследования – провести сравнительный анализ динамики показатели фагоцитарной активности нейтрофилов у детей и подростков с патологией тазобедренного сустава в процессе хирургического лечения методом чрескостного остеосинтеза по Илизарову.

Материалы и методы исследования

Проведено обследование 33 пациентов в возрасте от 3 до 15 лет с диспластической патологией тазобедренного сустава. Пациенты разделены на три группы с учетом возраста. В первую группу включены 10 детей в возрасте 3-6 лет, во вторую – 10 детей в возрасте 7–10 лет, в третью – 13 детей 11–15 лет.

Среди клинических проявлений заболевания отмечены: повышенная утомляемость, нарушение опорности и укорочение конечности, умеренное ограничение отведения в суставе. Болевой синдром был не выраженный. По данным рентгенографии, во всех наблюдениях имело место нарушение суставных соотношений, обусловленное недоразвитием впадины и деформацией проксимального отдела. Начальные рентгенологические признаки артроза (0–I ст. по Tonnis) выявлены у трех детей 14–15 лет. Во всех наблюдениях произведены внесуставные, реконструктивные операции. Для фиксации остеотомированных фрагментов использовали аппарат Илизарова. В анализируемой группе пациентов лечебный процесс протекал без воспалительных осложнений. Из обследуемой выборки были исключены пациенты с сопутствующей соматической патологией, способной повлиять на результаты иммунологического исследования. Родители детей, участвовавших в исследовании, дали информированное добровольное согласие на медицинское вмешательство и публикацию данных, полученных в результате исследования, без идентификации личности.

Для изучения фагоцитарной активности нейтрофилов (ФАН) применялась стандартная методика, основанная на количественном определении поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов по отношению к микробной тест – культуре (Staphylococcus epidermidis штамм № 9198 НИИЭМ). Рассчитывались следующие показатели ФАН: фагоцитарный показатель (ФП, %), фагоцитарное число (ФЧ, %). Лизосомальную активность нейтрофилов определяли, используя цитохимическое исследование клеток. Активность миелопероксидазы (МП) определялась по Грехему – Кнолю. Уровень лизосомальных катионных белков (КБ) цитоплазмы устанавливали в реакции с бромфеноловым синим. Уровень МП и КБ выражали в виде среднего цитохимического коэффициента (СЦК). Для подсчета нейтрофильных ловушек (НВЛ) использовали мазки крови, окрашенные по Романовскому – Гимза. Учет ФАН производился при помощи световой микроскопии под иммерсией, исходя из 100 подсчитанных нейтрофилов.

Анализ результатов исследования проводили с помощью программного обеспечения AtteStat, выполненного как надстройка к «Microsoft Exсel» программного продукта «Microsoft Office». Полученные данные обрабатывались с помощью методов непараметрической статистики с использованием U – критериев Вилкоксона, Манна – Уитни.

Результаты исследования и их обсуждение

У самых маленьких пациентов (3 – 6 лет) ранний послеоперационный период (14 суток после остеосинтеза) характеризовался статистически значимым повышением ФП c 59,13 ± 5,57 % до 59,13 ± 5,57 % при норме 65 – 88 %. ФЧ достоверно (p ≤ 0,05) повышалось с 6,83 ± 0,55 % до 8,4 ± 0,2 % при норме 6 – 10 %. МП снижалась с 2,1 ± 0,09 % до 1,8 ± 0,15 % при норме 2,1 – 2,5 %. Было выявлено увеличение количества нейтрофильных ловушек c 1,0 ± 0,53 % до 2,6 ± 0,4 % при норме 0 – 2,0 %. Содержание катионных белков оставалось на уровне дооперационных значений и не выходило за пределы границ возрастной нормы (таблица). На 28 сутки остеосинтеза ФП, МП вернулись к исходным показателям (ФП – 62,8 ± 6,07 %, МП – 2,12 ± 0,21). ФЧ и количество нейтрофильных ловушек по прежнему превышали значения дооперационного периода (ФЧ – 7,75 ± 0,47 %, НВЛ – 2,5 ± 0,05).

У детей в возрасте 7 – 10 лет иммунологические изменения были менее выраженными. Ранний послеоперационный период характеризовался достоверным увеличением количества нейтрофильных ловушек с 1,25 ± 0,25 % до 2,8 ± 0,37 % через 14 суток после остеосинтеза, до 3,7 ± 1,2 % через 28 суток после остеосинтеза при норме 0 – 2,0 %. При этом на протяжении 28 суток отсутствовали статистически значимые изменения со стороны ФП, ФЧ, МП, КБ.

У подростков в возрасте 11 – 15 лет динамика иммунологических показателей носила несколько другой характер. На 14-е сутки отеосинтеза было выявлено достоверное (p ≤ 0,05) повышение ФЧ с 7,7 ± 0,52 % до 9,9 ± 0,6 % при норме 6 – 10 %, увеличение МП с 2,3 ± 0,11 % до 2,5 ± 0,1 % при норме 2,1 – 2,5 %. Количество нейтрофильных ловушек повышалось c 1,7 ± 0,21 % до 4,5 ± 0,58 % при норме 0 – 2,0 %. Содержание катионных белков оставалось на уровне дооперационных значений и не выходило за пределы границ возрастной нормы (табл. 1). На 28 сутки остеосинтеза сохранялось более высокое, чем до остеосинтеза ФЧ (10,5 ± 0,83 %). Количество нейтрофильных ловушек составляло 3,2 ± 0,05 % и превышало дооперационные значения.

Клинические иммунологи выделяют несколько «критических» зон, связанных с физиологической перестройкой иммунной системы, одна из которых начинается в возрасте 4 лет и продолжается до 6-летнего возраста. Согласно литературным данным, перестройка гемопоэза в этом возрасте может сопровождаться появлением иммунопатологических состояний [6].

Только в этой возрастной группе в послеоперационном периоде наблюдалось кратковременное снижение МП (таблица). Как известно, выраженное снижение миелопероксидазы свидетельствует о декомпенсации противоинфекционной защиты и считается прогностически неблагоприятным признаком в плане развития послеоперационных осложнений [7].

Другой период иммунологической перестройки в жизни детей связан с резкой гормональной перестройкой организма подростков [5, 8]

Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов на этапах хирургического лечения

Примечание. * p ≤ 0,05, ** p ≤ 0,05 в сравнении с показателями дооперационного периода.