Во всём мире ВГС и ВИЧ-инфекция являются двумя наиболее серьёзными и распространёнными вирусными инфекциями, вызывающими значительную заболеваемость и смертность населения. В мире 40 миллионов человек живут с ВИЧ инфекцией, 170-200 миллионов с НС-вирусной инфекцией и 10 миллионов с сочетанием HCV/HIV-инфекций, что представляет серьезную проблему будущего.
Актуальность проблемы вирусного гепатита С (ВГС) и ВИЧ-инфекции в мире обусловлена высокой социально-экономической значимостью этих заболеваний, активным вовлечением в эпидемический процесс лиц репродуктивного, наиболее трудоспособного возраста, большой частотой формирования неблагоприятных исходов, значительными расходами государства на лечение лиц, инфицированных ВИЧ и ВГС. Частое сочетание этих двух инфекций, обусловленное общностью эпидемиологических и социальных предпосылок, приводит к ускорению прогрессирования патологического процесса в печени, заметно ухудшает прогноз. Широкое инфицирование вирусом ВГС и ВИЧ определённых групп населения делает эти инфекции индикаторами социального неблагополучия общества.
Отсутствие до настоящего времени средств специфической профилактики гепатита С и ВИЧ-инфекции ограничивает возможности контроля за их распространением. По широте распространения и наносимому экономическому ущербу гепатит С и ВИЧ-инфекция занимают одно из ведущих мест в инфекционной патологии человека [1, 2, 3, 4, 5, 6,7].
Ко-инфекцию ВИЧ и ВГС необходимо рассматривать как особое заболевание, отличающееся от моноинфекции как ВИЧ, так и ВГС и поэтому требует особых подходовк скринингу, диагностике и тактике ведения больных.
ВГС-инфекцию можно рассматривать как оппортунистическую инфекцию, наблюдающуюся у ВИЧ-инфицированных, поэтому всем пациентам с ВИЧ-инфекцией необходимо проводить скрининг на ВГС.
Цель исследования – провести анализ эпидемиологической ситуации при коинфекции ВИЧ/ВГС у пациентов азиатской национальности по Казахстану, с выявлением антител к ВГС, РНК с вирусной нагрузкой и генотипированием.
Материалы и методы исследования
Для решения поставленных целей и задач были исследованы 181 ВИЧ-инфицированных пациентов азиатской национальности после информированного согласия. Образцы крови были доставлены из некоторых регионов РК, в основном из Карагандинской области – 133, включая места лишения свободы (МЛС) и 1 ребенка из г. Темиртау. 41 образцов крови детей были доставлены на исследование из Южно-Казахстанской области (ЮКО) и остальные 7 из Алматинской, Жамбылской областей и г. Астаны.
ВИЧ – инфицированные мужского пола составили 103, женского пола 78, в том числе детей 42, мальчиков – 27 и девочек – 15.
Диагноз ВИЧ-инфекции у пациентов после положительного скринингового ИФА, проведенного на базе лаборатории СПИД-центра (г. Караганды), был подтвержден методом иммуноблоттинга в лаборатории Республиканского центра СПИД (г. Алматы).
Процесс исследования с последующим обследованием общеклиническими методами (осмотр пациента и изучение его/ее медицинской истории, анализа периферической крови и мочи, а также биохимического анализа крови).
Возраст пациентов с ВИЧ / ВГС варьировал от 18 до 60 лет, при этом основная часть приходилась от 29 до 60 лет – 93,2 %. В группе исследования превалировали мужчины (79,5 %), над женщинами (20,5 %), что объясняется высоким процентом потребителей инъекционных наркотиков – ПИНов (51,7 %) и множественными случайными половыми связями (48,3 %).
Анализ путей инфицирования показал, что у31 (42,4 %) заражение ВГС у ВИЧ-инфицированных пациентов произошло гемоконтактным путем, а именно внутривенно при введении наркотиков, 18 (24,7 %) пациентов приобрели инфекцию через половой контакт (инфицированные половые партнеры, случайные половые связи) и у 24 (32,9 %) уточнить источник инфицирования не представилось возможным.
При проведении ИФА использованы реагенты для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G и М к вирусу гепатита С «Бест анти – ВГС» (комплект 2).
Данный набор представляет собой набор реагентов, основой которого являются рекомбинантные антигены вируса гепатита С (ВГС) соответствующие участкам белков, кодируемых структурной (core) и неструктурной (NS3,NS4,NS5) областью генома ВГС, иммобилизованными на поверхности лунок разборного полистиролового планшета.
Основным свойством набора является способность выявлять в сыворотках (плазме) крови человека антитела класса IgG и IgM к ВГС.
Чувствительность и специфичность данных наборов – 100 %.
При проведении ПЦР использовались наборы «РеалБест РНК ВГС количественный» и «РеалБест РНК ВГС – генотип», ЗАО «Вектор-Бест» г. Новосибирск, Россия.
«РеалБест РНК ВГС количественный». Данный набор реагентов предназначен для выявления и количественного определения РНК вируса гепатита С (ВГС) в клинических образцах сыворотки или плазмы крови методом, основанным на обратной транскрипции вирусной РНК с последующей амплификацией к ДНК в полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени.
«РеалБест РНК ВГС – генотип». Данный набор реагентов предназначен для выявления и количественного определения РНК и дифференциации генотипов 1/2/3 вируса гепатита С (ВГС) в клинических образцах сыворотки или плазмы крови методом, основанным на обратной транскрипции вирусной РНК с последующей амплификацией к ДНК в полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени.Оборудование, использованное для проведения данного эксперимента:Термоциклер CFХ98, Сингапур.
Статистический анализ проводился с использованием пакета STATISTICA. Для оценки различий между сравниваемыми генеральными средними значениями использовался критерий Стьюдента
Результаты исследования и их обсуждение
Для всех ВИЧ-инфицированных пациентов проводится скрининг на ВГC при постановке диагноза ВИЧ, а затем повторяется ежегодно. В программу скрининга входит тест на антитела к вирусу гепатита C. Если результат этого теста положителен, определяется РНК ВГC и генотип. Наличие антител к ВГС свидетельствует об имеющейся или перенесенной инфекции. При хронической инфекции антитела персистируют неопределенно долгое время. ВИЧ-инфекция может ослаблять антительный ответ на ВГС-инфекцию, поэтому для выявления антител к ВГС у пациентов с коинфекцией следует использовать тест-системы иммуноферментного анализа (ИФА) второго или третьего поколения.
Из 181 обследованных пациентов у 73 были выявлены суммарные антитела к ВГС (anti-JgM+JgG). Этиология ГС вируса верифицирована качественной полимеразной цепной реакцией путем обнаружения РНК ВГС и количественным путем определена вирусная нагрузка.
У 73 пациентов азиатской национальности с диагностированным ВГС был проведен качественный, количественный анализ с генотипированием. Генотип 1 выявлен у 18 (24,7 %), генотип 2 – у 19 (26,0 %), генотип 3 – у 36 (49,3 %). По данным нашего исследования у большего количества пациентов преобладал 3 генотип (табл. 1).
Таблица 1
Определение генотипа ВГС в зависимости от клинической стадии у пациентов с ко-инфекцией ВИЧ/ВГС
|
Клинические стадии ВИЧ/количество больных |
Генотип – 1 (n=18) |
Генотип – 2 (n=19) |
Генотип – 3 (n=36) |
|
I (n=17) |
3 |
3 |
11 |
|
II (n=42) |
13 |
12 |
17 |
|
III (n=9) |
1 |
1 |
7 |
|
IV (n=5) |
1 |
3 |
1 |
Как видно из табл. 1 независимо от генотипа у всех пациентов с ВИЧ/ВГС выявлена преимущественно 2 клиническая стадия ВИЧ-инфекции.
Показателем активной вирусной репликации является определение вирусной нагрузки (ВН) в копиях РНК ВГС.
Также проведен сравнительный анализ средних показателей ВН ВГС у пациентов азиатской национальности с ко-инфекцией ВИЧ/ВГС в зависимости от стадии ВИЧ-инфекции и по генотипу ВГС (табл. 2).
Таблица 2
Средние показатели ВН ВГС в зависимости от клинической стадии ВИЧ-инфекции и по генотипам
|
Клинические стадии |
Средние показатели ВН ВГС по генотипам |
||
|
1 (n=18) |
2 (n=19) |
3 (n=36) |
|
|
I стадия |
185000±76,4 |
2090000±713,7 |
1624773±646,0 |
|
II стадия |
2682427±916,0 |
895683±2,847 |
3197905±1,076 |
|
III стадия |
- |
- |
8244285±4,148 |
|
IVстадия |
- |
846666±2,718 |
- |
У пациентов с I клинической стадией ВИЧ-инфекции при 1 генотипе ВГС средний показатель ВН составил – 185000±76,4; при 2 генотипе – 2090000±713,7; при 3 – 1624773±646,0. Со II клинической стадией ВИЧ-инфекции при 1 генотипе ВГС средний показатель ВН составил – 2682427±916,0; при 2 генотипе – 895683±2,847; при 3 – 3197905±1,076. С III клинической стадией ВИЧ-инфекции при 1 генотипе и 2 генотипах ВГС из-за малой выборки не проведена статистическая обработка, только при 3 генотипе средний показатель ВН был – 8244285±4,148. При IV стадии ВИЧ/ВГС с 1 и 3 генотипами количество больных было единичным, а со 2 генотипом средний показатель ВН был – 846666±2,718.
Заключение
Таким образом, установлено, что у пациентов азиатской национальности с ВИЧ/ВГС наибольший удельный вес имеет 3 генотип. Все наблюдаемые пациенты находились в разных клинических стадиях ВИЧ-инфекции, независимо от генотипа. Однако большее количество наблюдаемых пациентов были с I и особенно с II клинической стадией ВИЧ-инфекции, а с III и IV стадиями были единичны.
По результатам нашего исследования интерпретировать ВН у пациентов с ВИЧ/ВГС при I, III, IV стадиях ВИЧ-инфекции и по генотипу ВГС не представляется возможным, из-за малого количества выборок.
Сравнительный анализ средних показателей ВН у пациентов азиатской национальности с ко-инфекцией ВИЧ/ВГС в зависимости от стадии болезни и по генотипу ВГС проведен при II стадии ВИЧ-инфекции. По результатам наших данных при 1 и 3 генотипах ВГС отмечены высокие показатели ВН, чем при 2 генотипе, что связана с активностью вирусной репликации при ко-инфекции ВИЧ/ВГС, которая оказывает прогрессирующее влияние на течение гепатита С.
Общепринято, что при наличии 1 генотипа ВГС происходит наибольший риск прогрессии ВИЧ-инфекции, развития СПИДа с летальным исходом по сравнению с генотипами 2 и 3.
Данные нашего исследования соответствуют литературным данным, что генотип 3 чаще доминирует у пациентов с ВГС в Центральной Азии. 3 генотип вируса сопряжен с возможностью более агрессивного течения заболевания и менее благоприятным прогнозом, что следует учитывать в клинической практике, особенно при принятии решения о сроках начала и способах проведения ПВТ.
Недостаточность литературных данных по прогнозу течения ко-инфекции ВИЧ/ВГС с генотипом 3 дает возможность продолжить изучение данной проблемы.