Scientific journal
International Journal of Applied and fundamental research
ISSN 1996-3955
ИФ РИНЦ = 0,578

DETERMINATION OF FLAVONOIDS AND ALKALOIDS IS IN ASPLENIUM SEPTENTRIONALE (L.) HOFFM. BY THE METHOD OF HIGHLY PERFORMANCE LIQUID HROMATOGRAPHY (HPLC )

Aktaev E.K. 1 Shertaeva N.T. 1 Sadyakas Е.А. 1 Rakhmadiyeva S.B. 2
1 Taraz Innovative-Humanitarian University
2 L.N. Gumilev National Eurasian University
1308 KB
Results over of research are brought by the method of high-efficiency liquid chromatography (HPLC) of flavonoids and alkaloids of plant of Asplenium septentrionale (L.) Hoffm.
Flavonoids
alkaloids
chromatography
spectrometry
high efficiency liquid chromatography (HPLC)

В данном сообщении приведены результаты исследования методом ВЭЖХ флавоноидов и алкалоидов растения Asplenium septentrionale (L.) Hoffm., собранных на территории Баян – Аульского заповедника Павлодарской области [1]. Данный вид на содержание флавоноидов и алкалоидов ранее не изучался, хотя известно, что растения рода Asplenium L. богаты флавоноидами.

Цель: идентификация флавоноидов и алкалоидов растения Asplenium septentrionale (L.) Hoffm. Материалы и методы. В качестве объекта исследования было использовано растение Asplenium septentrionale (L.) Hoffm. Исследования были проведены на приборах ВЭЖХ со спектрометрическим детектором Agilent 1260 Infinity, ВЭЖХ с диодно-матричным детектором Agilent 1260 Infinity, газовым хроматографом с масс-спектрометрическим детектором Agilent 70000, спектрофотометре Shimadzu.

Методика приготовления к анализу флавоноидов. Навеску 5,0 г сырья (измельченного и просеянного через сито 1 мм) растения Asplenium septentrionale (L.) Hoffm. помещали в колбу и приливали 200 cм3 70 % раствора этанола и 4 мл хлороводородной кислоты, нагревали на водяной бане с обратным холодильником в течение 2 часов. Раствор количественно переносили в мерную колбу на 100 см3 и доводили до метки 70 % этанолом, затем колбу помещали в ультразвуковую баню [2].

Методика приготовления к анализу алкалоидов. Навеску 10 г сырья измельченного и просеянного через сито 1 мм помещают в колбу на 50 мл и приливают 70 % раствор метанола с уксусной кислотой 0,01 % и доводим до метки, рН раствора 3,5. Время экстракции 8 часов. Значение рН контролировали на рН-метре «Mettler Toledo» Seven Compact.Проводили твердофазную экстракцию готового сырья на сорбенте Strata C18 фирмы Phenomenex для дополнительной очистки. Концентрирование полученных экстрактов проводили на ВЭЖХ фирмы Agilent 1260, оснащенного коллектором фракций и колонкой размером 4,6x250 мм с Zorbax C8, размер частиц 5 микрон. Регистрацию спектров и обработку данных проводили на программе Open Lab Agilent.Расчет содержания индикаторных компонентов осуществляли по градуировочному графику [3].

Условия анализа флавоноидов методом ВЭЖХ: подвижная фаза – ацетонитрил- раствор трифторуксусной кислоты с рН 2,6 (35:65); скорость подвижной фазы – 1,2 см3/мин; температура колонки – 27 °С; детектирование – УФ, λ = 360 нм; объем вводимой пробы: 5 мм3. Условия анализа алкалоидов методом ВЭЖХ: температура колонки – 20 °С или при комнатной температуре, длина волны спектрофотометрического детектора – 210 нм, диапазон длин диодно-матричного детектора – 200–600 нм, скорость потока подачи элюента: 0,8-1 см/мин., объем вводимой пробы – 5-10 мкл.

Результаты. Определено общее содержание флавоноидов – 9,591 % , алкалоидов составило 0,011 %. Идентификация флавоноидов (кемпферол – 6,3 г/кг, кверцетин – 1,6 г/кг, лютеолин – 1,011 г/кг, апигенин – 0,68 г/кг) и алкалоидов (идентифицирован хинин) проводилась в соответствии с ГСО и банком библиотечных данных NITC.