Осетровые рыбы в настоящее время стоят на грани полного исчезновения. Одним из перспективных направлений аквакультуры считается товарное осетроводство, составной частью которого является производство белковой продукции, а также восполнения численности осетровых видов рыб. Самым важным в развитии товарного осетроводства является кормление новыми видами кормов, специфические добавки, биологически активные вещества призванные способствовать откормочному процессу, плодовитости популяции, стимуляции иммунной системы рыб. Разработка специализированных кормов должна опираться на строго научно-обоснованных данных о взаимодействии компонентов в корме, с пищеварительным трактом на органном, тканевом и клеточном уровне. Изучение физиологического состояния совершенно необходимо для более полной и всесторонней функциональной характеристики осетровых, их адаптационных возможностей [1]. Поэтому исследования направленные на изучение физиологических параметров у осетровых рыб на различных стадиях развития, изучение наиболее оптимальных видов корма, в зависимости от возраста, изучение способов увеличения воспроизводства рыб является первоочередной задачей для восстановления популяции этого ценнейшего вида рыб. В последние годы все большее развитие получает индустриальное осетроводство, основанное на интенсивных методах, при которых возможно управлять качеством водной среды и кормов, режимом кормления, осуществлять контроль за физиологическим состоянием и коррекцию здоровья рыб [2-5]. Как объект пастбищного и товарного рыбоводства на территории Казахстана, следует, прежде всего, изучить адаптационные возможности молоди стерляди в условиях разнотипных водоёмов и рыбоводных систем при различных кормах и при действии различных биодобавок, поскольку эта возрастная группа в большей степени подвержена воздействию различных абиотических и биотических факторов. Изменчивость морфофизиологических признаков рыб увеличивается при изменении условий содержания, корма, что позволяет изучить не только общие процессы роста и развития, но и адаптивные изменения, связанные с изменениями окружающей среды [6]. Вышеуказанное и определило проведение исследований физиологических особенностей рыб, механизмов адаптации организма в современной экосистеме.
Материалы и методы исследования
Эксперименты выполнены на 63 молоди стерляди, содержавшихся в Капчагайском научно-производственном хозяйстве с. Шалкар Алматинской области. В экспериментах были сформированы 4 группы: 1 группа – контрольные группы, содержавшихся на рационе ОТ-6. 2 группа, получавшиеся голландский корм «Coppens», 3 группа – содержались на рационе лучшего корма 2009 года и 4 группа, получавшихся новый корм 2012 г. (Экспериментальные корма, выработаны ТОО «КазНИИППП»: корма 2009 г. и 2012 г.). Комбикорма для молоди стерляди состояли из различных органических и минеральных компонентов с комплексным использованием отходов переработки кукурузы и обогащенных молочнокислыми бактериями.(поданы на патент).
По истечении срока кормления взвешивали каждую рыбку. Кровь на исследование осуществляли пункцией хвостовой вены рыб. Кровь забирали в пробирки с гепарином (2-3 Ед/мл). После центрифугирования (10 мин при 1500 об/мин) плазму отделяли от эритроцитов. В части наблюдений получали гемолизат эритроцитов, центрифугировали при 6000 g. В полученном гемолизате эритроцитов с помощью биуретовой методики определяли концентрацию общего белка. Определяли уровень перекисного окисления липидов по содержанию промежуточных (диеновые коньюгаты) и конечных (малоновый диальдегид) продуктов пероксидации, а также каталазную активность в гемолизате эритроцитов [7-8].
Полученные результаты статистически обрабатывали с использованием программы Microsoft Excel и изменения параметров с учетом непарного критерия Фишера – Стьюдента считали достоверными при р ≤ 0.05.
Результаты исследования и их обсуждение
В данных экспериментах использованы различные корма. Контрольная группа принимала корм ОТ-6. 2 группа получали голландский корм» Coppens», 3 группа, содержались на рационе лучшего корма 2009 года и 4 группа получали новый корм 2012 г.
Полученные данные представлены в таблице.
Контрольные и опытные величины параметров перекисного окисление липидов при кормлении стерляди разными кормами
|
Показатель |
ОБ г/л |
МДА нмоль/мл эритроцитов |
ДК нмоль/мл эритроцитов |
АК г(Н2О2)/мл эритроцитов |
|
Контроль – ОТ-6 |
46,62 ± 0,025* |
0,007 ± 0,002* |
1,72 ± 0,001* |
16,31 ± 0,05* |
|
Голландский корм |
69,73 ± 0,004* |
0,006 ± 0,001* |
1,14 ± 0,005* |
55,78 ± 0,10* |
|
2009 г. корм |
76,67 ± 0,001* |
0,014 ± 0,002* |
1,02 ± 0,002* |
84,34 ± 0,10* |
|
2012 г. корм |
84,96 ± 0,002* |
0,009 ± 0,001* |
0,095 ± 0,002* |
63,72 ± 0,05* |
Примечание. * – p < 0,001 – между группами.
Из исходных данных следует, повышение уровня общего белка при кормлении рыб голландским кормом, кормом 2009 года и кормом 2012 года соответственно 49 %, 64 % и 82 % по сравнению с контролем. Из рисунка видно, что при кормлении новым кормом 2012 года содержание общего белка увеличивается. (рис. 1) (p < 0,001).
Уровень перекисного окисление липидов в гемолизате эритроцитов при действии кормов судили по накоплению как промежуточных – ДК, так и конечных продуктов липопероксидации – МДА. Так отмечалось повышение уровня малонового диальдегида при действии корма 2009 года и 2012 года соответственно на 90 % и на 28 % и снижение этого показателя при кормлении голландским кормом на 14 % по сравнению с контролем (рис. 2. p < 0,001). Также можно отметить, что уровень продукта липопероксидации при действии корма 2012 г. была ниже, чем уровень продуктов липопероксидации при корме 2009 г.
Уровень содержание диенового конъюгата при действии голландского корма, корма 2009 г. и корма 2012 г. снизился соответственно на 33 % , на 44 % и на 40 % (рис. 3. p < 0,001).
Рис. 1. Содержания общего белка у стерляди при действии кормов, к – контроль, 1 – голландский корм, 2 – 2009 г. корм, 3 – 2012 г. корм
Рис. 2. Уровень малонового диальдегида (нмоль/мл эритроцитов) в гемолизате эритроцитов у стерляди при действии кормов, к – контроль, 1 – голландский корм, 2 – 2009 г. корм, 3 – 2012 г. корм
Рис. 3. Изменение содержания диеновых коньюгатов (нмоль/мл эритроцитов) в гемолизате эритроцитов у стерляди при действии кормов, к – контроль, 1 – голландский корм, 2 – 2009 г. корм, 3 – 2012 г. корм
Изменение уровня каталазной активности видно на рис. 4. Так уровень каталазной активности повышается при действии всех кормов в среднем в два раза. Наиболее выраженные изменения при действии корма 2009 г.
Рис. 4. Изменение каталазной активности (г Н2О2/мл эритроцитов) в гемолизате эритроцитов у стерляди при действии кормов, к – контроль, 1 – голландский корм, 2 – 2009 г. корм, 3 – 2012 г. корм
Таким образом, как показали проведенные исследования при кормлении разными кормами выявлены сдвиги. Отмечалось повышение малонового диальдегида при кормлении модифицированным кормом 2009 года по сравнению с кормом 2012 г. По экспериментальным данным уровень каталазной активности выше при действии корма 2009 года.
Уровень перекисного окисления липидов относится к одному из основных количественных показателей качества рыбного корма и определяется по содержанию в нем перекисей. При этом некоторые авторы отмечают также значительное возрастание уровня свободных жирных кислот в крови, что может служить подтверждением нашему предположению о взаимосвязи уровня гептанрастворимых липопероксидов с интенсивностью мобилизации нейтральных липидов из жировых депо и утилизации их как источника энергии. Установленный нами факт возрастания содержания продуктов ПОЛ у стерляди не противоречит результатам, полученным другими исследователями. Как показали полученные нами данные, в процессе адаптации к среде обитания и при кормлении кормом 2009 г. и кормом 2012 года происходит увеличение мощности антиоксидантной системы, что проявилось в возрастании уровня активности каталазы в плазме крови у молоди стерляди по сравнению с контролем. Эти данные хорошо согласуются с результатами, полученными другими исследователями [9-10]. По результатом исследовании можно судить, что из использованных кормов благоприятное действие на состояние про- и антиоксидантной систем оказывал корм 2012 года. Можно предположить, что качество корма 2012 года не уступает голландскому корму. Таким образом, корм, использованный в 2012 году, по сравнению с таковым, примененным в 2009 году, снижал уровень перекисного окисления липидов в гемолизате эритроцитов, о чем свидетельствует уменьшенное накопление промежуточных (диеновые коньюгаты), и конечных (малоновый диальдегид) продуктов липопероксидации. При этом повышается уровень антиоксидантной защиты организма стерляди.