Научный журнал

Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований

ISSN 1996-3955

ИФ РИНЦ = 0,593

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Дудченко А.В. 1 Авербах М.М. (мл.) 1 Карпина Н.Л. 1

---

1 ФГБНУ «Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза»

Проведено исследование концентрации хемокина IP-10 (CXCL-10) в сыворотке крови больных на поздней стадии ВИЧ инфекции (n = 14 чел.) и сочетания ВИЧ-инфекции на поздней стадии и различных форм туберкулеза органов дыхания (n = 21 чел.). Показана достоверно более высокая концентрация хемокина IP-10 сыворотки больных на поздней стадии ВИЧ инфекции и различных форм туберкулеза органов дыхания. Установлено, что уровень хемокина IP-10(CXCL-10) у больных на поздней стадии ВИЧ инфекции в сочетании с туберкулезом зависит от бактериовыделения. Показатель сывороточного хемокина IP-10 в подгруппе больных с бактериовыделением и без бактериовыделения составил соответственно: 2713,02 ± 498,15 pg/ml (CI ± 967,3 pg/ml) и 988,01 ± 319,28 pg/ml (CI ± 625,8 pg/ml) (Р = 0,012103). Концентрации хемокина IP-10 (CXCL-10) у больных ВИЧ-инфекцией в сочетании с туберкулезом не зависит от распространенности туберкулезного процесса. Для подгруппы больных с распространенными формами туберкулеза уровень сывороточного IP-10 составил 2021,39 ± 465,9 pg/ml (CI ± 913,16 pg/ml) и для подгруппы больных с локальными формами туберкулеза – 2616,25 ± 466,7 pg/ml (CI ± 914,7 pg/ml). Определение хемокина IP-10 является дополнительным диагностическим критерием в диагностике туберкулеза у больных на поздней стадии ВИЧ-инфекции.

Статья в формате PDF

4149 KB

ВИЧ

туберкулез

хемокин IP-10

1. Groom J.R., Luster A.D. CXCR3 ligands: redundant, collaborative and antagonistic functions // Immunol Cell Biol. – 2011. – V. 89. – P. 207–205.

2. Farber J.M. Mig and IP-10: CXC chemokines that target lymphocytes // J. Leukoc Biol. – 1997. – V. 61. – P. 246–257.

3. Alsleben N., Ruhwald M., Rüssmann H., Marx F.M., Wahn U., Magdorf K. Interferon-gamma inducible protein 10 as a biomarker for active tuberculosis and latent tuberculosis infection in children: A case – control study // Scandinavian Journal of Infectious Diseases. – 2012. – V. 44. – P. 256–262.

4. Lighter J., Rigaud M., Huie M., Peng C-H., Pollack H. Chemokine IP-10: an adjunct marker for latent tuberculosis infection in children // Int J. Tuberc Lung Dis. – 2009. – V.13. – P. 731–736.

5. Ruhwald M.,, Bodmer T., Maier C., JepsenM., HaalandM.B., Eugen-Olsen J., Ravn P. Evaluating the potential of IP-10 and MCP-2 as biomarkers for the diagnosis of tuberculosis // Eur Respir J. – 2008. – V.32. – P.1607–1615.

6. Васильева Е.В., Пантелеев А.М., Вербов В.Н., Тотолян А.А. Значение квантиферонового теста и IP-10 в диагностике туберкулеза у пациентов с ВИЧ-инфекцией // Медицинская иммунология (Иммунология туберкулеза, специальный выпуск). – 2015. – Т. 17. – С. 131–132.

7. García-Basteiro A.L., Mambuque E., den Hertog A., Saavedra B., Cuamba I., Oliveras L., Blanco S., Bulo H., Brew J., Cuevas L.E., Cobelens F., Nhabomba A., Anthony R. IP-10 Kinetics in the First Week of Therapy are Strongly Associated with Bacteriological Confirmation of Tuberculosis Diagnosis in HIV Infected Patients // ScieNTific Reports. – 2017. | 7: 14302 | DOI:10.1038/s41598-017-13785-3.

8. Petrone L., Cannas A. Vanini V., Cuzzi G., Aloi F., Nsubuga M., Sserunkuma J., Nazziwa R.A., Jugheli L., Lukindo T., Girardi E., Antinori A., Pucci L., Reither K., Goletti D. Blood and urine inducible protein 10 as potential markers of disease activity // Int J Tuberc Lung Dis. – 2016. – V.20. – P. 1554–1561.

Интерферон-гамма индуцибельный протеин 10 (IP-10), или CXCL10, является членом семейства CXC α-хемокинов, которые стимулируют миграцию и адгезию активированных Тх 1 клеток посредством связывания с CXCR3 рецептором [1]. IP-10 секретируется непосредственно макрофагальными клетками, инфицированными вирусами и бактериями, и еще в большей степени после того, как Т-клетки распознают специфические пептины на поверхности антиген-презентирующих клеток. Секреция IP-10 усиливается ИНФ-γ, вырабатываемым Т-хелперами 1 типа и многочисленными провоспалительными цитокинами IL-2, IFN-a, IFN-β, IL-27, IL-17, IL-23, вырабатываемыми аутокринно антиген-презентирующими клетками [1, 2].

К настоящему моменту во многих исследованиях показана диагностическая ценность спонтанной и антиген-стимулированной продукции IP-10 для выявления латентных форм туберкулеза и мониторинга эффективности лечения туберкулеза у детско-подросткового и взрослого контингента больных [3, 4].

В исследовании M. Ruhwald и соавт. (2008) [5] на взрослом контингенте была определена точка cut-off для антиген стимулированного синтеза IP-10 в 673 пг/мл, при превышении которой реакция считалась диагностически. J. Lighter и соавт. (2009) [4] определили аналогичный показатель для детей и подростков, который составил 732 пг/мл.

Исследования по использованию этого хемокина в качестве дополнительного диагностического иммунологического критерия для диагностики туберкулеза у больных с ВИЧ-инфекцией крайне малочисленные. Е.В. Васильева и соавт. (2015) изучали продукцию хемокина IP-10 у больных ВИЧ-инфекцией и впервые выявленным активным туберкулезом органов дыхания, подтвержденным ростом Mtb на питательных средах, в сравнении с пациентами с ВИЧ-инфекцией, у которых по результатам скрининга не было выявлено признаков активного туберкулеза [6]. При использовании выбранного авторами порогового значения 1087 пг/мл для IP-10 показана чувствительность выявления туберкулезного инфицирования 67 % (ДИ 50-81) и специфичность 92 % (ДИ 79-98). Garcia-Basteiro A.L. et al (2017) [7] определяли уровень выработки IP-10 у больных с сочетанием ВИЧ инфекции и туберкулеза, подтвержденного бактериологическим посевом до и в течение проведения курса противотуберкулезной химиотерапии. Авторы выявили превышение выбранной ими пороговой концентрации IP-10 в 781 пг/мл у 68,5 % больных ВИЧ-ТБ, не получавших антиретровирусную терапию, и у 70,5 % больных, получавших терапию концентрация IP-10 превышала уровень 1081 пг/мл. Petrone L. et al (2016) [8] исследовали концентрацию IP-10 в сыворотке и моче у больных ВИЧ-инфекцией, больных активными формами туберкулеза, сочетание ВИЧ + ТБ и здоровых доноров. Уровень хемокина сыворотки был выше у больных туберкулезом и у больных сочетанием ВИЧ + ТБ, тогда как в моче его концентрация повышалась преимущественно у больных активным туберкулезом.

Целью нашего исследования явилось определение диагностической значимости хемокина IP-10 (CXCL-10) в сыворотке больных на поздней стадии ВИЧ-инфекции и сочетанием ВИЧ-инфекции на поздней стадии с локальными и распространенными формами туберкулеза органов дыхания.

Материалы и методы исследования

Проведено обследование 35 больных на поздней стадии ВИЧ-инфекции, находившихся на обследовании в Клинической инфекционной больнице № 2 (КИБ № 2), г. Москва, и туберкулезной больнице им. А.Е. Рабухина ДЗМ по поводу интоксикационного синдрома и впервые выявленных изменений в легких. Среди обследованных было мужчин – 23 (65,7 %), женщин – 12 (34,3 %). Возраст пациентов варьировал от 19 до 62 лет. Критерии включения в исследование: ВИЧ-инфицированные в возрасте 18 лет и старше, имеющие симптомы вторичных заболеваний, с впервые выявленными изменениями в легких, независимо от количества СД4+ лимфоцитов. Критерии исключения из исследования: пациенты ВИЧ-инфекцией с хроническими формами туберкулеза и рецидивами туберкулеза. При сборе анамнеза жизни и заболевания было установлено, что на момент обследования в КИБ № 2 г. Москва ВИЧ-инфекция была впервые выявлена у 13 чел. (37,1 %), у 12 чел. (34,3 %) ВИЧ-инфекция была выявлена более 10 лет назад, антиретровирусную терапию (АРВТ) получали только 5 чел. (14,3 %).

Клинико-лабораторное обследование пациентов включало клинический и биохимический анализ крови. Для обнаружения возбудителя туберкулеза были применены микробиологические методы исследования диагностического материала (мокрота, БАЛ, спинномозговая жидкость): люминесцентная микроскопия, культуральные методы (посевы на твёрдые или жидкие – Versa TREK среды), молекулярно-генетическое исследование для обнаружения ДНК МБТ (ПЦР в режиме реального времени). Всем больным было проведено комплексное лучевое обследование органов грудной клетки, которое включало аналоговую рентгенографию, линейную томографию и спиральную компьютерную томографию высокого разрешения. Проводился анализ данных рентгенологического исследования и составление диагностических рядов, которое базировалось на изучении локализации изменений, установлении преимущественного поражения тех или иных отделов легких, формы, интенсивности и структуры отдельных элементов. Фибробронхоскопия с комплексом биопсий была выполнена у 18 чел. (51,4 %). Исследование выполнялось эндоскопами фирмы Olympus (Япония). В комплекс биопсий входили: диагностический бронхоальвеолярный лаваж с определением эндоцитограммы и микробиологическим исследованием диагностического материала (люминисцентная микроскопия, ПЦР-исследование, культуральные методы).

В соответствии с целью исследования пациенты были разделены на 2 группы: группа – ВИЧ-инфицированные (14 чел.) и группа ВИЧ + ТБ (21 чел.) – пациенты ВИЧ инфекцией, у которых по результатам обследования был диагностирован туберкулез. У всех пациентов туберкулез был диагностирован впервые. Среди клинических форм туберкулеза органов дыхания у пациентов группы ВИЧ + ТБ преобладала диссеминированная – 16 чел. (76,2 %), туберкулез внутригрудных лимфоузлов (ТВГЛ) и очаговая форма туберкулеза легких были диагностированы в единичных наблюдениях: у 4 чел. (19 %) и 1 чел. (4,8 %) соответственно. В зависимости от распространенности специфического поражения органов дыхания были выделены распространенные процессы (диссеминированный) и локальные процессы (ТВГЛУ и очаговый туберкулез). В группе пациентов «ВИЧ-инфекция» были диагностированы различные неспецифические заболевания органов дыхания, среди которых превалировала внебольничная пневмония – 12 чел. (85,8 %). Генерализованная цитомегаловирусная инфекция (ЦМВ) была выявлена у 1 чел. (7,1 %) и генерализованная криптоккоковая инфекция у 1 чел. (7,1 %).

Определение IP-10 в сыворотке проводили методом ИФА с помощью набора DuoSet Human IP-10 (CXCL-10) (R@D (Великобритания). Уровень сывороточного липоарабиноманнана определяли методом ИФА с помощью тест-системы LAM ELISA kit (SunLong Biotech Co., LTD). Результаты обрабатывали статистически с помощью Microsoft Exel.

Результаты исследования и их обсуждение

Уровень содержания IP-10 в сыворотке крови больных в группе ВИЧ + ТБ составил 2055,88 ± 378,6 pg/ml (CI ± 742,06 pg/ml) и был достоверно выше, чем в группе больных с ВИЧ инфекцией – 956,74 ± 142,8 pg/ml (CI ± 279,9 pg/ml; Р = 0,013747). Аналогичные различия выявлены и для показателей содержания ЛАМ в сыворотке больных этих двух групп (группа больных ВИЧ + ТБ 14,64 ± 3,24 pg/ml и группа больных с ВИЧ инфекцией 5,07 ± 1,1 pg/ml; Р = 0,011868) (рис. 1).

Проведен сравнительный анализ уровня сывороточного хемокина IP-10 в зависимости от распространенности туберкулезного процесса и наличия бактериовыделения. Для подгруппы с распространенными формами туберкулеза (n = 16 чел.) уровень сывороточного IP-10 составил 2021,39 ± 465,9 pg/ml (CI ± 913,16 pg/ml) и для подгруппы локальных форм туберкулеза (n = 5 чел.) – 2616,25 ± 466,7 pg/ml (CI ± 914,7 pg/ml) и не имел достоверных различий. Показатели сывороточного хемокина IP-10 в подгруппе больных с бактериовыделением (МБТ+) (n = 14 чел.) были достоверно выше, чем в подгруппе больных без бактериовыделения (МБТ-) (n = 7 чел.) и составили 2713,02 ± 498,15 pg/ml (CI ± 967,3 pg/ml) и 988,01 ± 319,28 pg/ml (CI ± 625,8 pg/ml) (Р = 0,012103). Результаты представлены на рис. 2.

Рассматривая уровень IP-10 в группе больных ВИЧ (956,74 ± 142,8 pg/ml) с учетом доверительного интервала показатель этого хемокина в сыворотке более 1236,64 pg/ml будет свидетельствовать в пользу наличия туберкулеза у этих больных.

Полученный нами показатель достаточно близок к таковому, выявленному в исследовании Е.В. Васильевой и соавт. (2015) [6]. Нами впервые выявлено значение влияния фактора бактериовыделения, подтвержденного культуральными методами, на показатель содержания IP-10 и отсутствие различий в уровне хемокина в зависимости от распространенности туберкулезного процесса.

Рис. 1. Содержание хемокина IP-10 (А) и ЛАМ(Б) в сыворотке крови обследованных больных

Рис. 2. Содержание хемокина IP-10 (CXCL-10) у больных группы ВИЧ + ТБ в зависимости от факторов распространенности процесса и бактериовыделения

Выводы

1. Концентрация хемокина IP-10 (CXCL-10) у больных на поздней стадии ВИЧ-инфекции в сочетании с туберкулезом достоверно превышает таковую у больных ВИЧ инфекцией.

2. Уровень концентрации хемокина IP-10 (CXCL-10) у больных на поздней стадии ВИЧ-инфекции в сочетании с туберкулезом зависит от бактериовыделения. Так, показатель сывороточного хемокина IP-10 в подгруппе больных с бактериовыделением и без бактериовыделения составил соответственно: 2713,02 ± 498,15 pg/ml (CI ± 967,3 pg/ml) и 988,01 ± 319,28 pg/ml (CI ± 625,8 pg/ml) (Р = 0,012103).

3. Уровень концентрации хемокина IP-10(CXCL-10) у больных ВИЧ-инфекцией в сочетании с туберкулезом не зависит от распространенности туберкулезного процесса. Для подгруппы больных с распространенными формами туберкулеза уровень сывороточного IP-10 составил 2021,39 ± 465,9 pg/ml (CI ± 913,16 pg/ml) и для подгруппы больных с локальными формами туберкулеза – 2616,25 ± 466,7 pg/ml (CI ± 914,7 pg/ml).

Библиографическая ссылка