Одним из основных направлений современной микробиологии является борьба с биоплёнками, формируемыми клинически значимыми штаммами микроорганизмов. По данным литературы, в условиях возрастания числа иммунокомпромиссных лиц, всё большую актуальность принимают условно-патогенные штаммы, в частности возбудители гнойно-воспалительных заболеваний (ГВЗ) [5,6,9]. Во внебольничных условиях S.aureus является одним из самых распространенным возбудителем фурункулеза и инфекций кожи и мягких тканей. Ранее нами изучено влияние ДМСО на вирулентные и адгезивные свойства раневой микрофлоры [2,3,4,7]. Препарат «Димексид» длительное время применяется в лечении ГВЗ как самостоятельное противовоспалительное средство, так и в составе комплексной терапии с другими противоспалительными препаратами, поскольку, облегчает диффузию молекул лекарственных средств в очаг воспаления. До настоящего времени нет зарегистрированных случаев формирования резистентности микроорганизмов к диметилсульфоксиду. Однако, в изученных нами источниках нет данных о влиянии препарата на формирование биоплёнок микроорганизмами. Принимая во внимание явную антиадгезивную активность ДМСО, возможно предположить наличие антибиоплёночного эффекта. Поэтому, учитывая вышесказанное, интересным представляется изучение антибиоплёночной активности препарата «Димексид» в отношении штаммов S.aureus, который является ведущим этиологическим агентом ГВЗ.
Цель исследования. Изучение влияния диметилсульфоксида на формирование биоплёнок стафилококков фотометрическим методом.
Методы исследования. При изучении влияния ДМСО на биоплёнкообразование бактерий рода Staphylococcus в качестве тест-культур использовали штаммы изолированные из раневого отделяемого. Всего изучено 20 штаммов стафилококков. Изученные штаммы проявляли характерные для коагулазоположительных стафилококков свойства: лецитиназную, гемолитическую, плазмокоагулазную, антилизоцимную активность и обладали способностью к образованию биоплёнок. Нами применялся препарат «Димексид», ОАО «Марбиофарм», действующее вещество – диметилсульфоксид (ДМСО), в 25 %, 12 % и 6 % концентрации. Мы исследовали эффект разных концентраций ДМСО на формирование биоплёнок экспериментальными штаммами стафилококков. Биоплёнкообразование исследовали фотометрическим методом, определяя способность штаммов микроорганизмов к адгезии на поверхности 96-луночной полистероловой планшеты с последующей окраской кристаллическим фиолетовым по методу[8] . Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием программы Excel 7,0.
Результаты и их обсуждение. Внесение в среду культивирования ДМСО в вышеуказанных концентрациях приводило к достоверному (р<0,05) снижению биоплёнкообразования по сравнению с контролем. Установлено, что снижение концентрации препарата сопровождалось увеличением его антибиоплёночной активности. Так при концентрации препарата 25 % показатели оптической плотности составили
0,444 ± 0,0035, тогда как значения контроля составили 0,949 ± 0,004. При концентрации ДМСО 6 % и 12 % оптическая плотность была равна 0,111 ± 0,001 и 0,0925 ± 0,0055 соответственно.
Корреляционный анализ выявил наличие положительной взаимосвязи между концентрацией препарата и показателями оптической плотности (r = 0,93), полученными с помощью фотометрического метода, что, возможно объясняется улучшением подвижности молекул ДМСО при низких концентрациях. В наших предыдущих экспериментах по исследованию влияния ДМСО на адгезивные свойства стафилококков было установлено дозозависимое снижение адгезивной активности от воздействия препарата. Наблюдаемый аналогичный эффект с биоплёнкообразованием клиническими изолятами стафилококков позволяет сделать предположение о блокаде первого этапа биоплёнкообразования, а именно, адгезии к поверхности. Кроме того, возможно, имеются и другие механизмы антибиоплёночной активности препарата. Возможно, данный эффект проявляется в проникновении молекул ДМСО в толщу матрикса на более поздних этапах формирования биоплёнки и ингибирование роста (или гибель) бактериальных клеток.
Библиографическая ссылка
Хренов П.А., Честнова Т.В., Гладких П.Г. ЭФФЕКТ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА В ОТНОШЕНИИ БИОПЛЁНКООБРАЗОВАНИЯ ШТАММАМИ STAPHYLOCOCCUS AUREUS // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2014. – № 5-1. – С. 140-141;URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=5302 (дата обращения: 21.11.2024).