В последние десятилетия большое значение в регуляции гомеостатических процессов уделяется антиоксидантной системе организма и перекисному окислению липидов (ПОЛ), при обязательном участии которых происходят все метаболические процессы. Скорость окисления в биомембранах клеток невысокая, однако, воздействие различных факторов приводит к изменению активности антиоксидантной защиты и увеличению продукции свободных радикалов, которые запускают процессы перекисной модификации липидов клеточных мембран, приводя к накоплению продуктов ПОЛ. Последнее служит сигналом для мобилизации системы нейрогуморальной регуляции и, как следствие, активации антиоксидантной защиты организма [6]. Нередко этих антиоксидантных механизмов оказывается недостаточно, что обусловливает резкое усиление ПОЛ с образованием промежуточных продуктов радикальной природы, вторично индуцирующих свободно-радикальные реакции. Высокая интенсивность ПОЛ вызывает морфологические изменения в различных клеточных элементах тканей организма, которые характеризуются увеличением проницаемости и разрушением цитоплазматических, внутриклеточных мембран, митохондрий и микросом [1]. Все вышесказанное объясняет тот факт, что мощность антиоксидантных систем организма является важнейшим фактором резистентности организма к воздействию различных факторов, в частности в условиях применения различных лекарственных средств [8].
До настоящего времени дапсон (4,4’-сульфонилбис[бензоламин]) остаётся основным препаратом при терапии лепры. Кроме этого, он успешно применяется при лечении и других заболеваний, таких как герпетиформный дерматит Дюринга, туберкулез, малярия, пневмоцистная пневмония, токсоплазмоз, кожный лейшманиоз, мицетома, провоцируемая актиномицетами; ревматоидный артрит, субкорнеальный дерматоз, отдельные поражения кожного покрова (на фоне системной красной волчанки), кольцевидная гранулема, гангренозная пиодермия и др. Препарат имеет высокую фармакологическую активность, но обладает рядом существенных нежелательных эффектов, связанных с формированием при его метаболизме гидроксиламин-производных, характеризующихся, по многочисленным данным, оксидативными свойствами [10,11]. Несмотря на это, некоторые исследователи вопрос об анти- и прооксидантных свойствах дапсона оставляют открытым, ссылаясь на собственные экспериментальные данные [9].
Сказанное выше актуализирует поставленную нами цель работы, направленную на проведение исследований по оценке интенсивности антиоксидантной защиты организма на фоне применения дапсона с последующим изучением возможности его сочетанного применения с известными антиоксидантом α-токоферолом ацетатом.
Материалы и методы исследования
Исследование проведено на белых нелинейных крысах-самцах 6-8 мес. возраста (весом 210–280 г.). Животных содержали в стандартных условиях вивария при естественном освещении. Все крысы были синхронизированы по питанию при свободном доступе к воде. Эксперименты проводили в весенне-летний период.
Животные были разделены на группы по 10 особей в каждой:1-ю группу составляли контрольные крысы, получавшие в качестве плацебо эквиобъем дистиллированной воды; 2-ю группу – особи, получавшие внутрижелудочно дапсон (фирма «Novartis») в дозе 25 мг/кг в течение 14 дней; 3-ю группу – животные, получавшие внутрижелудочно дапсон в дозе 25 мг/кг и per os α -токоферол ацетат в дозе 5 мг/кг в течение 14 дней.
Уровень антиоксидантной защиты организма оценивали на основании определения активности каталазы [3], содержанию МДА в реакции с ТБК [2] в сыворотке крови, определения перекисной резистентности эритроцитов [4,5] и интенсивности ПОЛ в печени (определяли исходное содержание МДА, скорость спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ) [7].
Статистическую обработку полученных данных осуществляли с помощью пакетов программ: Microsoft Office Excel 2007 (Microsoft, США), BIOSTAT 2008 Professional 5.1.3.1. с использованием t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони. Различия между параметрами считали достоверными при p<0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Данные, полученные в ходе эксперимента показали, что введение дапсона способствует статистически значимому увеличению содержания в сыворотке крови животных ТБК-активных продуктов: в среднем на 30 % (p<0,05) (табл. 1).
При сочетанном введении дапсона и α-токоферола данный показатель в сравнении с контрольными животными практически не изменяется и остаётся в среднем на 20 % (p<0,05) ниже относительно содержания ТБК у крыс, получавших только дапсон (табл. 1).
Таблица 1
Влияние дапсона и его сочетанного применения с α-токоферолом на уровень ТБК-активных продуктов и активность каталазы в сыворотке крови крыс
Показатели |
Экспериментальные группы (n=10) |
||
Контроль |
Дапсон (25мг/кг) |
Дапсон (25 мг/кг) + α-ТФ (5 мг/кг) |
|
Уровень ТБК-активных продуктов (M ± m, мкмоль/л) |
3,0 ± 0,1 |
3,9 ± 0,3 * |
3,1 ± 0,2 # |
Активность каталазы (M ± m, %) |
27,4 ± 1,7 |
37,2 ± 1,6** |
27,8 ± 1,4 ## |
Примечание.* – p<0,05; ** – p<0,01;*** – p<0,001 – относительно контроля; # – p<0,05; ## – p<0,01; ### – p<0,001 – относительно животных, получавших дапсон (t-критерий Стьюдента с поправкой Бонферрони для множественных сравнений); α-ТФ – α-токоферол.
Оценка уровня активности каталазы в сыворотке крови в группе крыс, получавших дапсон, показала повышение данного показателя в среднем на 35 % (p<0,01). На наш взгляд, это может быть объяснено либо гемолитическими свойствами дапсона: повышение уровня каталазы на фоне увеличения в крови ТБК-активных продуктов произошло за счёт выхода фермента в плазму из разрушенных эритроцитов, где уровень каталазы очень высок, либо это свидетельствует об адаптивном резервном «выбросе» каталазы, что при более длительной нагрузке дапсоном может привести к истощению антиоксидантной системы. Не исключено, а может быть и более адекватно, сочетание обоих факторов.
При комбинированном введении α-токоферола и дапсона уровень активности фермента был сопоставим с контрольным показателями (табл. 1).
При исследовании влияния дапсона на процессы пероксидации в печени было выявлено повышение уровня ПОЛ: исходного – более чем на 40 % (р<0,01), спонтанного и аскорбатзависимого – в среднем на 30 % (р<0,05) и 40 % (р<0,01) соответственно (табл. 2).
Таблица 2
Влияние дапсона и и его сочетанного применения с α-токоферолом на показатели ПОЛ в гомогенате печени крыс
Показатели Экспериментальные группы (n=10) |
Исходный уровень МДА, M±m, нмоль/0,5г ткани |
Скорость спонтанного ПОЛ, M±m, нмоль/ч |
Скорость аскорбатзависимого ПОЛ, M±m, нмоль/ч |
Контроль |
2,24 ± 0,18 |
13,11 ± 0,63 |
11,32 ± 0,74 |
Дапсон (25 мг/кг) |
3,58 ± 0,24** |
16,85 ± 1,11* |
15,91 ± 0,96** |
Дапсон (25 мг/кг) + α-ТФ (5 мг/кг) |
2,31 ± 0,17 ## |
13,36 ± 0,97 # |
11,93 ± 1,03 # |
Примечание.* – p<0,05; ** – p<0,01;*** – p<0,001 – относительно контроля; # – p<0,05; ## – p<0,01; ### – p<0,001 – относительно животных, получавших дапсон (t-критерий Стьюдента с поправкой Бонферрони для множественных сравнений); α-ТФ – α-токоферол
Введение α-токоферола в сочетании с дапсоном корригировало уровень перекисных процессов. В гомогенате печени наблюдали значительное снижение уровня ПОЛ: исходного – на 60 % (р<0,01), спонтанного – на 30 % (р<0,05), аскорбатзависимого на 40 % – (р<0,01) относительно животных в условиях введения дапсона (табл. 2).
Таблица 3
Влияние дапсона и его сочетанного применения с α-токоферолом на показатели перекисной резистентности эритроцитов крыс
Показатель |
Экспериментальные группы (n=10) |
||
Контроль |
Дапсон (25 мг/кг) |
Дапсон (25 мг/кг) + α-ТФ (5 мг/кг) |
|
Содержание гемолизированных эритроцитов ( %) |
3,9 ± 0,5 |
6,7 ± 0,6** |
4,1 ± 0,3## |
Примечание.* – p<0,05; ** – p<0,01;*** – p<0,001 – относительно контроля; # – p<0,05; ## – p<0,01; ### – p<0,001 – относительно животных, получавших дапсон (t-критерий Стьюдента с поправкой Бонферрони для множественных сравнений); α-ТФ – α-токоферол.
При изучении гемолитической стойкости эритроцитов было выявлено, что введение дапсона приводит к усилению процессов ПОЛ и в мембранах эритроцитов в среднем в 2 раза (р<0,01) (табл. 3).
Проведение комбинированной терапии способствовало уменьшению деструктивного влияния дапсона на мембраны эритроцитов: уровень резистентности эритроцитов значительно отличался от показателей у крыс, получавших только дапсон – в среднем на 40 % (р<0,01), с показателями контрольных крыс имел ряд несущественные отличий (табл. 3).
ЗаключениеТаким образом, в условиях введения дапсона наблюдается истощение антиоксидантной системы организма крыс, выражающееся в усилении процессов пероксидации и реактивном увеличении уровня каталазы в сыворотки крови, а также катализации перекисного окисления липидов печени и снижении резистентности эритроцитарных мембран, что свидетельствует о прооксидантном действии его метаболитов.
Введение α-токоферола ацетата в указанной дозировке обеспечивает существенный защитный эффект от нежелательного дапсон-индуцированного деструктивного влияния. Результаты проведенного нами экспериментального исследования позволяют сделать вывод о перспективности применения α-токоферола в качестве корректора, что делает актуальным дальнейшее изучение его активности в данном направлении на клиническом уровне.
Библиографическая ссылка
Лужнова С.А., Самотруева М.А., Самотруева М.А., Ясенявская А.Л., Дуйко В.В. ВЛИЯНИЕ α-ТОКОФЕРОЛА ПРИ СОЧЕТАННОМ ВВЕДЕНИИ С ДАПСОНОМ НА ИНТЕНСИВНОСТЬ ОКИСЛИТЕЛЬНО-ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫХ РЕАКЦИЙ // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2014. – № 5-2. – С. 102-104;URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=5347 (дата обращения: 17.08.2024).