Известно, что генетически детерминированные особенности различных поведенческих реакций и функциональных актов нервной системы закладываются в ходе ее онтогенетического развития, и их основу составляют генетически детерминированные нервные сети [3].
Половая дифференциация мозга (ПДМ) представляет собой гормон-зависимый процесс, который осуществляется в критическом периоде онтогенеза при участии половых стероидов и катехоламинов по механизму коиндукции [6]. Это обстоятельство позволяет предполагать, что у животных, имеющих изменения в генотипе дофаминовых рецепторов (экспрессия mРНК DRD2 имеет место в периоде ПДМ, 7), могут иметь место и особенности в морфогенетическом действии половых стероидов. Если это предположение является верным, то следует ожидать, что у животных с разным генотипом по определенным локусам генов рецепторов дофамина будут различия в структурно-функциональной организации нервной системы, затрагивающие нейронные сети (системы), ответственные за репродуктивные процессы, и они найдут отражение в своеобразии поведенческих реакций у особей разного пола.
Исследования проведены на 148 половозрелых крысах линии WAG/Rij в возрасте шести месяцев, которые на основании генотипа по локусу TAG1A гена рецептора дофамина второго типа (DRD2) были разделены на две группы. Первая группа крыс (всего 83, из них 47 самок и 36 самцов) имела генотип А1/А1, т.е. была гомозиготной по аллелю А1. Вторая группа крыс (всего 65, из них 34 самок и 31 самцов) с генотипом А2/А2 по локусу TAG1A DRD2 - гомозиготной по аллелю А2. Указанные группы крыс были выращены на кафедре морфологии и физиологии человека и животных Башкирского государственного университета путем скрещивания гомозиготных особей, выявленных генетическим анализом [1] в исходной популяции крыс линии WAG/Rij, полученных из Института ВНД и нейрофизиологии РАН от профессора Г.Д.Кузнецовой. В ранее опубликованной работе [4] была дана сравнительная характеристика поведения изучаемых нами крыс без дифференциации их по полу.
Крысы линии WAG/Rij являются инбредной линией с генетически детерминированной абсансной эпилепсией. Важным звеном в патогенетических механизмах этой формы эпилепсии является дефицит дофаминэргической системы, при этом ведущее значение имеет изменение уровня функционирования дофаминовых рецепторов второго типа (DRD2) [5].
Всех использованных в работе крыс содержали в стандартных условиях вивария, характеризующихся постоянством комнатной температуры (200-220)С и уровнем влажности. Еду и питье животные получали ad libitum. Крыс содержали в открытых проволочных клетках при естественном освещении. В каждой клетке находилось не более пяти крыс. Клетки с самками и самцами крыс располагали рядом друг с другом. Отсутствие скученности животных в клетках и доступность феррмонов способствовали регулярной работе нейроэндокринной системы репродуктивных процессов, на что указывали и контрольные анализы влагалищных мазков, периодически выполнявшиеся по ходу эксперимента.
Изучали ориентировочно-исследова-тельское поведение крыс с помощью методики «открытое поле», которая впервые была предложена К.Холлом [8], в настоящее время это один из самых распространенных методов регистрации поведения грызунов, который широко используется в экспериментальной нейробиологии. «Открытое поле» представляло собой квадратную освещенную арену, разделенную на 16 равных частей. В течение 5 минут регистрировали такие параметры как латентный период до первого движения, число пересеченных квадратов в центре и на периферии поля, количество стоек в центре и на периферии поля, эпизоды груминга и общее время их проведения, неподвижность, уринации, число болюсов с занесением их в протокольные листы. Регистрацию параметров поведения проводили в течение десяти дней. Математико-статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью программы «Statistica 5.5». Полученные результаты приведены в таблицах 1 - 4.
Приведенные в таблице 1 данные показывают, что по общей двигательной активности (а также по числу амбуляций в центре поля и его периферии) самки крыс с генотипом А1/А1 значимо отличаются от самцов. Они также активнее по исследовательской деятельности, о чем свидетельствуют данные, приведенные в таблице № 2. По числу эпизодов груминга и его общей продолжительности самцы и самки с генотипом А1/А1 по локусу TAG 1A DRD2 имеют значимые различия, которые по уровню значимости составляют соответственно p<0,001 и p<0,01.
Показатели двигательной активности самцов и самок крыс с генотипом А1/А1 по локусу TAG1A DRD2 в открытом поле (М±m)
Пол животных |
Неподвижность (сек) |
Двигательная активность (число амбуляций - количество пересеченных квадратов) |
||
общая |
В центре |
По периферии |
||
Самцы |
1,40±0,47 |
60,84±2,64 |
4,77±0,39 |
56,07±2,53 |
Cамки |
0,19±0,27 |
99,45±3,47 |
10,16±0,72 |
88,97±3,06 |
p |
>0,05 |
<0,001 |
<0,001 |
<0,001 |
Таблица 2.
Показатели исследовательской деятельности и груминга самцов и самок крыс с генотипом А1/А1 по локусу TAG1A DRD2 в открытом поле (М±m)
Пол животных |
Количество вертикальных стоек |
Груминг |
Уринация |
|||
общая |
Центр ОП |
Периферия ОП |
Кол-во эпизодов |
Общее время сек |
число |
|
Самцы |
15,15±0,99 |
0,81±0,10 |
14,35±0,94 |
2,27±0,19 |
10,99±0,75 |
0,12±0,04 |
Cамки |
24,83±1,39 |
1,89±0,22 |
22,93±1,27 |
3,51±0,24 |
14,75±1,07 |
0,07±0,02 |
p |
<0,001 |
<0,001 |
<0,001 |
<0,001 |
<0,01 |
>0,05 |
Регистрация двигательной активности крыс с генотипом А2/А2 в «открытом поле», проводившаяся в строго стандартных условиях вместе с крысами с генотипом А1/А1 по тому же локусу DRD2, представлена в таблице 3. Представленные результаты показывают, что и самцы, и самки крыс с генотипом А2/А2 имеют практически одинаковое число пересеченных квадратов открытого поля (количество амбуляций), что свидетельствует об их низкой двигательной активности. При перемещении по полю, они часто замирают, оставаясь в состоянии неподвижности.
Показатели исследовательской активности и груминга этих крыс представлены в таблице 4. Они свидетельствуют о том, что самки этой группы крыс имеют значимо более выраженную исследовательскую деятельность, которая выражается большим числом вертикальных стоек, которые они совершают преимущественно по периферии поля. У самок значимо больше время, которое они проводят в груминге, но количество эпизодов груминга не увеличено по сравнению с самцами. Это говорит о том, что имеет место незавершенный груминг [2].
Таблица 3.
Показатели двигательной активности самцов и самок крыс с генотипом А2/А2 по локусу TAG1A DRD2 в открытом поле (М±m)
Пол животных |
Неподвижность (сек) |
Двигательная активность (число амбуляций) |
||
общая |
В центре |
По периферии |
||
Самцы |
8,11±5,09 |
43,34±3,94 |
2,44±0,31 |
40,89±3,19 |
Cамки |
11,34±3,96 |
49,83±4,22 |
3,61±0,52 |
46,21±3,77 |
p |
>0,05 |
>0,05 |
>0,05 |
>0,05 |
Таблица 4.
Показатели исследовательской деятельности и груминга самцов и самок крыс с генотипом А2/А2 по локусу TAG1A DRD2 в открытом поле (М±m)
Пол животных |
Количество вертикальных стоек |
Груминг |
Уринация |
|||
общая |
Центр ОП |
Периферия ОП |
Кол-во эпизодов |
Общее время сек |
число |
|
Самцы |
6,68±0,87 |
0,53±0,11 |
6,15±0,87 |
1,66±0,42 |
5,03±1,08 |
0,03±0,02 |
Cамки |
10,90±1,40 |
0,55±0,14 |
10,35±1,32 |
2,38±0,35 |
9,58±1,48 |
0,03±0,01 |
p |
<0,05 |
>0,05 |
<0,01 |
>0,05 |
<0,05 |
>0,05 |
Полученные результаты показывают, что влияние фактора пола на поведение у крыс с генотипом А1/А1 по локусу TAG 1A DRD2 более выражено, чем у крыс с генотипом А2/А2. Поскольку поведение животных является своеобразным интегральным показателем фенотипических особенностей нервной системы, отражающим ее структурно-функциональную организацию, можно говорить, что полученные нами результаты позволяют предполагать правомерность высказанного выше предположения и указывают на необходимость детального изучения морфологических и молекулярно-биологических характеристик мозга крыс линии WAG/Rij с модификацией аллельной структуры по указанному локусу DRD2.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Калимуллина Л.Б., Ахмадеев А.В., Бикбаев А.Ф.и др. Медицинская генетика, 2005, №5, с.198.
2. Калуев А. В. // Нейронауки, 2006, том 6, №4, с. 14.
3. Корочкин Л.И., Михайлов А.Т. Введение в нейрогенетику. М., Наука, 2000.
4. Леушкина Н.Ф., Калимуллина Л.Б.// Успехи современного естествознания, 2008, №10, с.18.
5. Мидзяновская И.С., Кузнецова Г.Д., Туомисто Л. и др. // Нейрохимия, 2004, т.21, №4, с.264.
6. Резников А.Г., Пишак В.П., Н.Д. Носенко и др. Пренатальный стресс и нейроэндокринная патология. Черновцы, Из-во «Медакадемия», 2004.
7. Сергеев П.В., Шимановский Н.Л., Петров В.И. Рецепторы физиологически активных веществ. М., Наука, 1999.
8. Hall C.S.// J.Comp. Psychol., 1934. V.18, N.3, p.385.
Библиографическая ссылка
Леушкина Н.Ф., Ахмадеев А.В., Калимуллина Л.Б. Исследование влияния фактора пола на поведение крыс с модификацией аллельной структуры гена рецептора дофамина второго типа (DRD2) // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2009. № 4. С. 14-0;URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=77 (дата обращения: 19.05.2025).