Научный журнал
Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований
ISSN 1996-3955
ИФ РИНЦ = 0,593

ИЗУЧЕНИЕ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ СОЕДИНЕНИЙ ГОРЛЮХИ ЯСТРЕБИНКОВОЙ (PICRIS HIERACIOIDES L.)

Бубенчикова В.Н. 1 Степнова И.В. 1
1 ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет»
Объектом исследования явилась воздушно-сухая трава горлюхи ястребинковой (Picris hieracioides L.), заготовленной в 2016 году в Курской области в период цветения растения. Изучен качественный и количественный состав азотсодержащих соединений травы горлюхи ястребинковой. Наличие азотистых оснований в траве определяли в водных экстрактах с помощью качественных реакций и бумажной хроматографии. Методом бумажной хроматографии обнаружено 4 соединения, отнесенные к азотистым основаниям с Rf 0,19, Rf 0,29, Rf 0,35, Rf.0,51. Для количественного определения азотистых оснований использовали метод Г.А. Луковниковой и А.И. Есютиной. Этот метод основан на определении оптической плотности азотистых оснований с солью Рейнеке. Содержание суммы азотистых оснований в траве горлюхи ястребинковой составляет 0,048 %, в том числе холина – 0,014 %. Аминокислотный состав представлен 16 соединениями: аспарагиновой кислотой, треонином, серином, глутаминовой кислотой, пролином, глицином, аланином, валином, метионином, изолейцином, лейцином, тирозином, фенилаланином, гистидином, лизином, аргинином; 7 из которых относятся к незаменимым.
горлюха ястребинковая
азотистые основания
аминокислоты
1. Бубенчиков Р.А., Позднякова Т.А. Изучение азотсодержащих соединений травы герани сибирской (Geranium sibiricum L.) // Вопросы обеспечения качества лекарственных средств. – 2013. – № 1. – С. 27–28.
2. Бубенчикова, В.Н., Левченко В.Н. Аминокислотный и минеральный состав травы хондриллы ситниковидной // Современные проблемы науки и образования [Электронный ресурс]: электрон. науч. журн. – 2015. – № 5 (61). – Режим доступа: http://science-education.ru/128–21450, свободный.
3. Дикорастущие полезные растения Росси / под ред. А.Л. Буданцева, С.П. Лесиовской. – СПб., 2001. – 663 с.
4. Иллюстрированный определитель растений Средней России. Т. 3: Покрытосеменные (двудомные: раздельнолепестные) / И.А. Губанов, К.В. Киселева, В.С. Новиков, В.Н. Тихомиров. – М.: Товарищество науч. изд. КМК, Ин-т технологических исследований, 2004. – С. 465.
5. Позднякова Т.А., Бубенчиков Р.А. Изучение азотсодержащих соединений герани болотной // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. – 2015. – № 11. – С. 37–39.
6. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т. 5. Семейство Asteraceae (Compositae). Часть 2. Роды Echinops – Youngia / Отв. ред. А.Л. Буданцева. – СПб.; М.: Товарищество науч. изд. КМК, 2013. – 312 с.

Горлюха ястребинковая (Picris hieracioides L.) – дву- или многолетнее травянистое растение, широко распространенное в областях Центрального Черноземья [4].

Горлюха ястребинковая широко применяется в народной медицине в качестве мягчительного, потогонного, легкого слабительного средства [3]. Фармакологические исследования показали наличие антиоксидантной, противовоспалительной, антибактериальной и цитотоксической активности, у водно-спиртовых экстрактов из надземной части горлюхи ястребинковой [6].

Однако, химический состав горлюхи ястребинковой мало изучен недостаточно, имеются только отдельные сведения о качественном содержании биологически активных веществ, так в надземной и подземной частях растения найдены сесквитерпеновые лактоны, в листьях идентифицирован ?-ситостерин [6], в частности не изучены азотсодержащие соединения.

Азотсодержащие соединения имеют важное значение для организма человека. Азотистые основания участвуют в иммунных реакциях организма человека. Холин входит в состав фосфолипидов: лецитина и сфингомиелина, оказывает липотропное действие, являются составной частью лекарственных препаратов, применяемых для лечения и профилактики заболеваний нервной, сердечно-сосудистой систем.

Целью нашей работы явилось изучение азотсодержащих соединений травы горлюхи ястребинковой.

Объектом исследования служила измельченная воздушно-сухая, трава горлюхи ястребинковой заготовленная в 2016 г. в окрестностях города Курска в период массового цветения растения.

Материалы и методы исследования

Изучение азотистых оснований проводили в водном извлечении, для чего 5,0 г измельченного сырья заливали 50 мл воды очищенной и нагревали с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 1 часа. Извлечение фильтровали, сырье заливали снова 50 мл воды и операцию повторяли. Водные извлечения, полученные после трехкратной экстракции, объединяли, упаривали под вакуумом до 25 мл и использовали для определения азотистых оснований.

Наличие азотистых оснований устанавливали с помощью качественных реакций (с раствором кислоты фосфорновольфрамовой 3 %; с реактивом Манделина; с раствором кислоты хлористоводородной и бриллиантовым зеленым) и методом хроматографии на бумаге в системе растворителей н-бутанол – кислота уксусная – вода (4:1:2), в качестве проявителя выступали пары йода [5].

Количественное содержание азотистых оснований определяли по модифицированной методике Г.А. Луковниковой и А.И. Есютиной. В основе методики лежит определение оптической плотности окрашенных комплексов азотистых оснований с солью Рейнеке. Для определения азотистых оснований сырье исчерпывающе экстрагировали горячей водой очищенной и в полученном извлечении определяли холин и сумму азотистых оснований. Для этого к водному извлечению прибавляли раствор кислоты хлористоводородной до pH – 3, раствор охлаждали, далее прибавляли раствор соли Рейнеке и помещали в холодильник на 18 часов для полного осаждения азотистых оснований. Осадок окрашенного комплекса растворяли в ацетоне и не позднее 5 минут колориметрировали на фотоэлектроколориметре при синем светофильтре (при длине волны 400±10 нм), в кювете с толщиной слоя 10 мм. Параллельно в тех же условиях измеряли оптическую плотность раствора стандартного образца холин-стандарта с солью Рейнеке [5].

При определении суммы азотистых оснований к водному извлечению прибавляли 0,1Н раствор калия перманганата и нагревали на кипящей водяной бане 10 минут, чтобы азотистые основания окислились до холина. Последующее определение проводили как для холина.

Качественное обнаружение аминокислот проводили в водном извлечении с помощью нингидриновой реакции, а также анализировали их состав хроматографией в тонком слое сорбента [2]. Для хроматографического анализа 0,03–0,05 мл полученного извлечения хроматографировали в тонком слое сорбента на пластинках «Sorbfil» в системе растворителей 96 % спирт этиловый – конц. аммиак (16:4,5) с достоверными образцами аминокислот. Хроматограмму высушивали на воздухе, обрабатывали спиртовым раствором нингидрина 0,2 % и нагревали в сушильном шкафу при 100–105° С в течение нескольких минут. Аминокислоты проявлялись в виде красно-фиолетовых пятен [2].

Суммарный аминокислотный состав определяли на аминокислотном анализаторе – автоматизированном жидкостном хроматографе (ААА 400), для этого точную навеску сырья (0,2 г), вносили в колбу со шлифом, прибавляли 20 мл раствора 6 М кислоты хлористоводородной, плотно закрывали и термостатировали при температуре 110°С в течение 23 часов. По окончании гидролиза колбу охлаждали до комнатной температуры, фильтровали кислое извлечение и при использовании роторного испарителя выпаривали досуха. К сухому остатку добавляли 5 мл воды очищенной и процедуру повторяли дважды для удаления остатков кислоты хлористоводородной.

К полученному сухому остатку приливали 50 мл загрузочного буфера (рН – 2,2), который готовили следующим образом: в мерную колбу на 1 литр вносили отвешенные 14 г лимонной кислоты, 11,5 г хлорида натрия, 0,1 г азида натрия, 5 мл тиодигликоля, водой очищенной объем доводили до метки. В подготовленную ионообменную колонку вносили полученный и отфильтрованный раствор.

Аминокислотный анализ проводили при следующих условиях: поток буферных растворов 0,3 мл/мин, скорость потока нингидринового реактива 0,2 мл/мин, детектирование проводили в УФ областях при 440 и 570 нм, температура термостата реактора 121°С [2].

Результаты исследования и их обсуждениие

С помощью качественных реакций установили наличие азотистых оснований в траве горлюхи ястребинковой. Хроматографический анализ извлечения из травы горлюхи ястребинковой показал наличие 4 пятен имеющих темно-оранжевую окраску, отнесенные к азотистым основаниям, со значениями Rf 0,19, Rf 0,29, Rf 0,35, Rf.0,51.

Результаты количественного определения, проведенного методом фотоэлектроколориметрии показывают, что содержание суммы азотистых оснований в траве горлюхи ястребинковой составляет 0,048 %, в том числе холина 0,014 %;

Результаты качественного анализа аминокислот позволили установить их наличие в траве горлюхи ястребинковой. При хроматографическом анализе аминокислоты проявлялись в виде красно-фиолетовых пятен. Методом хроматографического анализа на бумаге установили аминокислотный состав горлюхи ястребинковой. Аминокислотный состав травы горлюхи ястребинковой представлен 16 аминокислотами: аспарагиновой кислотой, треонином, серином, глутаминовой кислотой, пролином, глицином, аланином, валином, метионином, изолейцином, лейцином, тирозином, фенилаланином, гистидином, лизином, аргинином. Среди идентифицированных аминокислот 7 являются незаменимыми (таблица).

Наибольшее содержание отмечено для аспарагиновой кислоты (1,44 %) и глутаминовой кислоты (1,36 %).

Выводы

Изучен качественный и количественный состав азотсодержащих соединений травы горлюхи ястребинковой (Picris hieracioides L.)

Содержание суммы азотистых оснований в траве горлюхи ястребинковой составляет 0,048 %, в том числе холина – 0,014 %.

Изучен качественный и количественный состав аминокислот травы горлюхи ястребинковой. Всего обнаружено 16 аминокислот, из них 7 – незаменимых. Наибольшее содержание отмечено у аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты.

Содержание связанных аминокислот в траве горлюхи ястребинковой, %

Наименование аминокислоты

Содержание связных аминокислот, мг/100 мг в пересчете на абсолютно сухое сырье

Аспарагиновая кислота

1,44

Треонин*

0,50

Серин

0,48

Глутаминовая кислота

1,36

Пролин

1,26

Глицин

0,52

Аланин

0,55

Валин*

0,64

Метионин*

0,05

Изолейцин*

0,51

Лейцин*

0,80

Тирозин

0,25

Фенилаланин*

0,52

Гистидин

0,40

Лизин*

0,63

Аргинин

0,63

Примечание. * – незаменимые аминокислоты.

 


Библиографическая ссылка

Бубенчикова В.Н., Степнова И.В. ИЗУЧЕНИЕ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ СОЕДИНЕНИЙ ГОРЛЮХИ ЯСТРЕБИНКОВОЙ (PICRIS HIERACIOIDES L.) // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2016. – № 11-6. – С. 1133-1135;
URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=10738 (дата обращения: 21.04.2024).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674