Научный журнал
Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований
ISSN 1996-3955
ИФ РИНЦ = 0,564

СОСТОЯНИЕ КАЛЛИКРЕИН-КИНИНОВОЙ СИСТЕМЫ ТКАНИ ЯИЧНИКОВ ПРИ ТРАНСФОРМАЦИИ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА

Франциянц Е.М. 1 Комарова Е.Ф. 1 Черярина Н.Д. 1
1 ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России
В образцах ткани доброкачественных (цистаденомы, n=20), злокачественных опухолей яичников (цистаденокарциномы IIIстадии, n=35), яичников, удаленных во время операции по поводу миомы матки (условно интактные, n=18) изучали содержание прекалликреина, активность калликреина и общую аргининэстеразную активность. В ткани злокачественной опухоли яичников показана активация калликреин-кининовой системы с увеличением содержания предшественников и нарушением соотношения компонентов. Следует отметить отсутствие различий исследуемых показателей в контралатеральных непораженных яичниках от показателей в пораженном злокачественной опухолью парном яичнике.
калликреин-кининовая система
доброкачественные и злокачественные опухоли яичников
1. Боброва Т.С. Семейство калликреиновых генов человека: биология и роль в развитии рака яичников и других заболеваниях // Вестник Российского онкологического научного центра РАМН. 2006. 17, № 4 С.3-12.
2. Гомазков О.А. Типы реагирования калликреин-кининовой системы при различных функциональных и патологических изменениях в организме // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1982. № 1. С. 70–76.
3. Зорина В.Н., Козлов И.Г., Третьякова Т.В. , Промзелева Н.В., Баженова Л.Г., Зорина Р.М., Рябичева Т.Г., Зорин Н.А. Некоторые реактанты острой фазы при различных типах пролиферативных заболеваний придатков матки // Клиническая лабораторная диагностика. 2009. № 10. С. 16-19.
4. Кит О.И., Франциянц Е.М., Козлова Л.С., Терпугов А.Л. Статус трипсиновых протеиназ и кининовой системы в ткани злокачественных опухолей и полипов толстой кишки // Российский онкологический журнал. 2013. № 4. С.6-9.
5. Пасхина Т.С., Яровая Г.А. Калликреин сыворотки крови человека. Активность фермента и хроматографический метод определения // Биохимия. – 1970. 35 (5). С. 1055–1058.
6. Пасхина Т.С., Кринская А.В. Упрощенный метод определения калликреиногена и калликреина в сыворотке (плазме) крови человека в норме и при некоторых патологических состояниях // Вопр. мед.химии. 1974. 20 (6). С. 660–663.
7. Яровая Г.А., Блохина Т.Б., Нешкова Е.А. Контактная система. Новые представления о механизмах активации и биорегулирующих функциях // Биохимия. 2002. 67 (1). С. 16–29.
8. Siewinski M., Saleh Y., Popiela A., Ziolkowski P., Jelen M., Grybos M. Expression of high molecular weight cysteine proteinase inhibitor in ovarian cancer tissues: regulation of cathepsin B expression by placental CPI // Biol Chem. – 2003. – 384: 1103-1107.
9. Termini L., Maciag P., Soares F., Nonogaki S., Pereira S., Alves V., Longatto-Filho A. Villa L Analysis of human kallikrein 7 expression as a potential biomarker in cervical neoplasia // Int.J. Cancer.-2010. – 127, N2. – P.485-490.
10. Wolf K., Wu Y.I., Liu Y,. Geiger J., Tam E., Overall C., Stack M.S., Friedl P. Multi-step pericellular proteolysis controls the transition from individual to collective cancer cell invasion // Nat Cell Bio. – 2007. – l 9(8):893-904.

Интерес к структурно-функциональным особенностям и молекулярной биологии отдельных компонентов калликреин – кининовой системы (ККС), молекулярным механизмам их взаимодействия и связи с другими регуляторными системами объясняется участием ее в регуляции широкого спектра физиологических функций организма [7]. Вместе с тем, регуляторная физиологически активная система может стать причиной или участником патологических событий в организме [3; 10]. Функционирование ККС имеет большое значение в процессах морфогенеза клеток, увеличении проницаемости сосудистой стенки, реакции иммунного ответа, развитии воспаления и трансформации клеток, патогенезе злокачественного роста [1; 4]. Существенным прорывом в понимании функций ККС явилось изучение и клонирование генов кининогена и тканевых калликреинов [7].

Механизм участия тканевых калликреинов в канцерогенезе рака яичников пока не известен, но данные, имеющиеся в литературе, указывают на то, что эти биоактивные вещества могут быть использованы в качестве дополнительных диагностических и прогностических маркеров рака яичников [1; 8].

Целью настоящего исследования явилось сравнительное изучение активности калликреина, прекалликреина и общей аргининэстеразной активности в ткани обоих яичников при доброкачественных и злокачественных процессах.

Материалы и методы исследования

Были изучены образцы ткани: доброкачественных эпителиальных опухолей яичников – цистаденомы(20 пациенток), злокачественных опухолей яичников без лечения – цистаденокарциномы(35 больных IIIстадии) иморфологически неизмененных яичников, удаленных во время операции по поводу миомы матки – условно интактные (18 пациенток). Во всех случаях была изучена ткань левого и правого яичников.

Медиана возраста составила 56,5±2,6 лет. Все женщины находились в переменопаузе и различных сроках менопаузы. Во всех случаях получено письменное добровольное информированное согласие больных на использование материала для научных исследований.

В 10 % цитозольных фракциях, приготовленных на 0,1М калий-фосфатном буфере рН 7.4, содержащим 0,1 % Твин-20 и 1 % БСА проводили определение калликреина, прекалликреина, общей аргининэстеразной активности протеиназ трипсинового типа по методу Пасхиной Т.С., Яровой Г.А. [5] и Пасхиной Т.С. и др. [6].

Статистический анализ результатов проводили с помощью пакета Statistica(версия 8). Оценка достоверности произведена с использованием t-критерия Стьюдента. Уровень Р<0,05принимали как значимый.

Результаты исследования и их обсуждение

Результаты проведенного исследования представлены в таблице 1. Не было найдено достоверно значимых различий между показателями в условно интактной ткани яичников и ткани доброкачественных образований.

Таблица 1

Показатели калликреин-кининовой системы в ткани яичников

Образцы ткани

Общая аргининэстеразная активность,

мкМ/г ткани

Калликреин,

мкМ/г ткани

Прекалликреин,

мкМ/г ткани

левый

правый

левый

правый

левый

правый

Интактные яичники

(n=18)

1420±93

1200±76

243,5±

19,8

215,7±

23,2

727,1±

64,6

601,6±

70,2

Доброкачествен-ные опухоли яичников(n=20)

1505±84

1304±83

199,7±

22,5

221,5±

16,3

701,8±

53,2

682,1±

49,7

Злокачественные опухоли правого яичника (n=10)

2108±

137, 01

1839±

1251

909,0±

72,41

981,7±

56,91

1490,2±

112,71

1499,5±

125,31

Злокачественные опухоли левого яичника (n=11)

1875±

1161

1860±

971

1199,9±

86,91

1136,2±

91,41

1763,8±

142,81

1690,5±

135,31

Злокачественные опухоли при двустороннем поражении яичников (n=14)

1899±

1251

1995±

1491

1018,1±

92,41

1199,9±

87,61

1687,9±

135,21

1733,4±

146,81

Примечание. 1 – отличие от условно интактного яичника (р<0,05).

Жирным шрифтом выделены показания в контралатеральном яичнике.

Вместе с тем, имели место выраженные изменения активности исследуемых звеньев ККС при злокачественных опухолях яичников относительно значений в условно интактной ткани яичников. Так при двустороннем поражении показатель активности калликреина в ткани злокачественной опухоли был в среднем в 4,8 раза выше, чем средний показатель в ткани условно интактного яичника. Активность прекалликреина превосходила соответствующий нормативный показатель в 2,6 раза, а АЭА – в 1,5 раза.

При правостороннем процессе активность калликреина в злокачественной опухоли была повышена относительно показателя в условно интактной ткани в 4,3 раза, активность прекалликреина – в 2,3 раза, АЭА – в 1,4 раза. При левостороннем злокачественном процессе в ткани опухоли активность калликреина превосходила нормативные показатели в 5,2 раза, прекалликреина – в 2,7 раза, АЭА – в 1,4 раза.

При двусторонних поражениях яичников уровень ПК, активность К и АЭА достоверно не различался в обоих яичниках. Следует отметить отсутствие различий исследуемых показателей в контралатеральных непораженных яичниках от показателей в пораженном злокачественной опухолью парном яичнике (табл. 1).

Основными компонентами ККС являются сериновыепротеиназы, одна из функций которых заключена в осуществлении ограниченного протеолиза – важного специфического механизма функционального взаимодействия белков организма. При оценке функционирования ККС необходимо учитывать не только активность калликреина, как биологически активного вещества, но и состояние промежуточных звеньев его синтеза или распада, например прекалликреина, как предшественника [2]. Поэтому мы сочли целесообразным изучить в ткани исследуемых образцов коэффициенты соотношения прекалликреин/калликреин (ПК/К), характеризующие эффективность образования калликреина из его предшественника, а также долю активности калликреинав общей АЭА. Результаты представлены в табл. 2. Установлено, что вне зависимости от локализации злокачественной опухоли и ее распространенности коэффициент соотношения ПК/К оказался в среднем на 30 % ниже, чем в ткани условно интактных яичников. Естественно, такие же значения были получены в ткани контралатеральных непораженных опухолью яичников.

Далее было изучено долевое участие активности калликреинав общей АЭА. Установлено, что в ткани злокачественной опухоли вне зависимости от ее локализации и распространенности, а так же в ткани контралатеральных яичников, процентное отношение активности калликреинак суммарной АЭА возрастало в среднем в 3,2 раза (табл. 2).

Таблица 2

Значения коэффициента прекалликреин/калликреин и процентного содержания калликреина в общей аргининэстеразной активности в ткани яичников

Образцы ткани

Коэффициент соотношения прекалликреин/калликреин

(ПК/К)

Коэффициент соотношения калликреин/ общая аргининэстеразная активность

(К/АЭА)

Левый яичник

Правый яичник

Левый яичник

Правый яичник

Интактные яичники

2,2±0,2

2,1±0,2

17,1±1,5

18,0±1,4

Злокачественные опухоли правого яичника (n=10)

1,6±0,151

1,5±0,11

43,1±3,51

53,3±4,21

Злокачественные опухоли левого яичника (n=11)

1,5±0,11

1,5±0,21

64,0±5,81

61,1±4,31

Злокачественные опухоли при двустороннем поражении яичников (n=14)

1,5±0,11

1,5±0,11

53,6±3,81

60,1±4,61

Примечание. 1 – отличие от условно интактного яичника (р<0,05).

Жирным шрифтом выделены показания в контралатеральном яичнике.

Анализируя полученные результаты изучения активности компонентов ККС, а именно: калликреина, прекалликреина, общей АЭА, а так же коэффициента ПК/К и К/АЭА, можно резюмировать следующее. В ткани злокачественной опухоли яичников вне зависимости от ее локализации имеет место активация указанной системы с увеличением содержания предшественников и качественным нарушением соотношения компонентов. Это свидетельствует о «поломке» регуляторных связей в калликреин-кининовой системе, и переходе их из разряда физиологических в статус патологических [2]. Интересно, что это же касается и контралатеральных морфологически не измененных яичников.

В отличие от плазменных калликреинов, механизм активации предшественников калликреиновв тканях с экзокринной функцией и их секретах, в частности, в половых железах практически не изучен. Наше внимание привлекла новая концепция об активации калликреин-кининовой на поверхности эндотелиальных клеток [7]. И хотя этот механизм описан как активация протеолитических систем плазмы крови, некоторые положения этой концепции могут быть применены для объяснения процессов, происходящих в тканях. Согласно этой концепции, благоприятные условия активации ККС создаются при образовании полибелкового ансамбля на поверхности эндотелиальной клетки, в состав которого входят кроме высокомолекулярного кининогена и прекалликреина, рецептор активатора плазминогенаурокиназного типа (UPAR), рецептор q-субъединицы первого компонента комплемента (gC1qR), фактор XII и цитокератин 1.

Вероятно, изучение активности тканевой фибринолитической системы может дать полезную информацию для выяснения механизмов активации тканевых калликреинов.


Библиографическая ссылка

Франциянц Е.М., Комарова Е.Ф., Черярина Н.Д. СОСТОЯНИЕ КАЛЛИКРЕИН-КИНИНОВОЙ СИСТЕМЫ ТКАНИ ЯИЧНИКОВ ПРИ ТРАНСФОРМАЦИИ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2014. – № 2-2. – С. 52-54;
URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=5007 (дата обращения: 24.09.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074